试回答影响限制性内切核酸酶切割效率的因素？答：外因：是可以预见的，如反应条件（缓冲液、反应温度、反应时间、终止酶切的方法）、底物的纯度（是否有杂质、是否有盐酚的污染）、何时加酶、操作是否恰当、反应体积等等内因：星星活性、末端长度、位点偏爱、甲基化底物、底物的构象。2、何为载体？一个理想的载体应具备那些特点？答：将外源DNA或基因携带入宿主细胞（hostcell）的工具称为载体载体具备的特点：①在宿主细胞内必须能够自主复制（具备复制原点）②必须具备合适的酶切位点，供外源DNA片段插入，同时不影响其复制③有一定的选择标记，用于筛选④最好具有较高的拷贝数，便于制备。3、什么叫基因工程（Ge
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g），试从理论和技术两个方面谈谈Ge
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g诞生的基础？答：基因工程：在体外将核酸分子插入病毒、质粒或其它载体分子，构成遗传物质的新组合，并使之参入到原来没有这类分子的宿主细胞内，而能持续稳定地繁殖。理论基础：近几十年来，由于受到分子生物学、分子遗传学发展的影响，基因分子生物学的研究取得了前所未有的进步。而这些学科的综合成就，又为基因工程的诞生奠定了坚实的理论基础：①在40年代确定了遗传信息的携带者，即基因的分子载体是DNA而不是蛋白质，从而明确了遗传的物质基础问题；②在50年代揭示了DNA分子的双螺旋结构模型和半保留复制机理，解决了基因的自我复制和传递的问题；③在50年代末期和60年代，相继提出了