2016高考仿真练1．2015山东烟台一模科学家将鱼抗冻蛋白基因转入番茄，使番茄的耐寒能力大大提高。下图一是转基因抗冻番茄培育过程的示意图，图二为质粒限制酶酶切图谱。鱼的抗冻蛋白基因不含图中限制酶识别序列，Ampr为抗氨苄青霉素基因，其中①～④是转基因抗冻番茄培育过程中的相关步骤，Ⅰ、Ⅱ表示相关结构或细胞。请据图作答：
1为了在番茄中获得抗冻蛋白必须将抗冻蛋白基因连接在质粒中的________之后。图中③、④依次表示组织培养过程中番茄组织细胞的________________过程。2在构建基因表达载体时，可用一种或者多种限制酶进行切割。该酶的特点________。3要利用培养基筛选出已导入含鱼的抗冻蛋白基因的番茄细胞，应使基因表达载体Ⅰ中含有________作为标记基因。4研究人员通常采用________法将鱼抗冻蛋白基因导入番茄细胞内。通常采用________技术，在分子水平检测目的基因是否翻译形成了相应的蛋白质。答案1启动子脱分化、再分化
2识别特定的DNA序列并在特定位点切割3抗氨苄青霉素基因Ampr4农杆菌转化或基因枪法等抗原抗体
2．科研人员利用胚胎干细胞ES细胞对干扰素基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如下图，请回答相关问题：
1过程①获得重组胚胎之前需要通过________技术获得重组细胞，接受细胞核的去核卵母细胞应该处于________时期。2步骤②中，重组胚胎培养到囊胚期时，可从其________分离出ES细胞。步骤③中，需要
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f构建含有干扰素基因的________，构建之前可以利用________技术对目的基因进行扩增。3将基因导入ES细胞常用的方法是________，体外诱导ES细胞向不同方向分化是利用了ES细胞的________。4为检测干扰素基因的表达情况，可采用________方法，若有杂交带出现，表明目的基因已成功表达。答案1核移植MⅡ2内细胞团基因表达载体PCR3显微注射法全能性4
抗原抗体杂交3．2015山东淄博模拟农杆菌侵染植物细胞后，能将Ti质粒上的TDNA插入到植物基因组中。图示为利用农杆菌培育转基因植物的基本流程，请据图作答：
1剪除Ti质粒的某些片段、替换复制原点O与添加抗生素的抗性基因T的过程①中，需用________处理DNA以防止DNA片段的自身环化，需用________“缝合”双链DNA片段的平末端。2目的基因是指编码蛋白质的结构基因和一些________。由过程②形成的运载体中，目的基因的首端具有________识别和结合的部位。3过程③常用________处理使农杆菌成为感受态细胞。在过程⑤⑥前，常采用________技术检测农杆菌和愈伤组织细r