2．21
动物细胞培养和核移植技术
1．简述动物的细胞培养及条件。重点2．举例论证动物细胞培养技术的应用及意义。3．简述动物核移植的过程及意义。重、难点
动物细胞培养
一动物细胞工程1．常用的技术手段：动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合、生产单克隆抗体等。2．基础：动物细胞培养技术。二动物细胞培养1．概念：从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。2．过程取动物组织块
分散组织细胞：剪碎，用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理一段时间
制成细胞悬液
原代培养：具有贴壁生长和接触抑制的特点
再分瓶继续培养传代培养②10～50代左右时，细胞增殖缓慢，甚至停止③部分细胞核型发生变化，少部分细胞获得不死性，能无限增殖
①先用胰蛋白酶等处理贴满瓶壁的细胞，3．相关概念1细胞贴壁：细胞悬液中分散的细胞贴附在瓶壁上。
1
f2细胞的接触抑制：当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞停止分裂增殖的现象。3原代培养：指动物组织消化后的初次培养。4传代培养：贴满瓶壁的细胞，出现接触抑制后，需要重新用胰蛋白酶等处理，然后分瓶继续培养，让细胞继续增殖的培养过程。4．培养条件无菌、无毒的环境
对培养液和所有培养用具进行无菌处理在细胞培养液中添加一定量的抗生素定期更换培养液，以便清除代谢产物
无机物：无机盐、微量元素等2营养有机物：糖、氨基酸、促生长因子、血清、血浆等温度：365±05℃3温度和pHpH：72～74O2：维持细胞代谢4气体环境CO2：维持培养液的pH
5．应用连线表示动物细胞培养的应用及实例①生产生物制品②用于基因工程③检测有毒物质④用于生理、病理、药理等研究提示：①b②c③d④aa．筛选抗癌药物b．干扰素、单克隆抗体c．培养受体细胞d．判断物质毒性
合作探讨探讨1：为什么切取动物组织块进行细胞培养时，常选择胚胎或幼龄动物的器官或组织？提示：因为这些细胞增殖能力强，分化程度低，更容易培养。探讨2：在进行动物细胞培养过程中，为什么需用胰蛋白酶处理动物组织？提示：因组织中细胞间基质成分为蛋白质，利用胰蛋白酶可以分解细胞间的蛋白质。探讨3：探究动物细胞培养时，为什么要在培养基中加入血清、血浆等天然成分？提示：因血清和血浆中含有多种维持细胞正常代谢和生长的物质，如蛋白质、氨基酸、未知的促生长因子等。r