owthfactorβ，TGFβ在调控细胞外基质的聚积中起重要作用［1］。在哺乳类动物，TGFβ有三种亚型：TGFβ1、TGFβ2及TGFβ3。在胚胎发育、组织修复和纤维化病变中，TGFβ三种亚型的表达不尽相同，提示在体内病理过程中，TGFβ各亚型所起的作用可能不同。TGFβ特异结合的受体有三种：Ⅰ型受体TβRⅠ介导细胞外基质的聚积，Ⅱ型受体TβRⅡ与TGFβ的抑制细胞生长的作用密切相关，Ⅲ型受体TβRⅢ则是将结合的TGFβ分子呈递于上述的两种受体而发挥作用。有关TGFβ1在肾小球疾病中的作用，
f已有大量文献报道。但有关TGFβ2、TGFβ3及与细胞外基质聚积有关的TβRⅠ在肾小球疾病中的作用，目前国外仅有少数报道［2，3］，而对于人MsPGN各期病变TGFβ各亚型及其受体的变化，尚未见报道。材料和方法1标本：MsPGN患者的肾活检标本38例，其中轻度MsPGN20例，中度MsPGN10例，重度MsPGN8例。以10中性福尔马林固定，石蜡包埋，切片厚度为4μm。2试剂：第一抗体包括：兔抗人TGFβ1，β2，β3及TβRⅠ多克隆抗体Couser教授惠赠，美国Sa
taCruze公司产品，鼠抗人Ⅳ型胶原、层粘连蛋白单克隆抗体、兔抗人纤粘连蛋白抗体DAKO产品，山羊抗人Ⅲ型胶原抗体美国南方生物技术公司产品。采用SP试剂盒美国Zymed公司产品，购于北京中山生物试剂公司，包括：生物素标记抗兔IgG抗体，生物素标记抗鼠IgG抗体，生物素标记抗山羊IgG抗体；辣根过氧化物酶HRP标记链酶亲合素streptavidi
。3方法：采用免疫酶染色技术LAB法。步骤：脱蜡、水化。03过氧化氢甲醇液灭活内源性过氧化物酶。01透明质酸酶溶液TGFβ各亚型及其受体染色，或04胃蛋白酶溶液细胞外基质成分染色，37℃消化30分钟。2小牛血清白蛋白BSA封闭非特异染色。滴加适当稀释的第一抗体，4℃过夜。滴加生物素标记的第二抗体1∶300稀释，37℃孵育30分钟。滴加辣根过氧化物酶标记的链酶亲合素HRPStreptavidi
，1∶300稀释，37℃孵育45分钟。滴加DABH2O2显色液，于显微镜下监测显色。最后苏木素对比染色，常规脱水、透明、封片。上述各步骤间BSA封闭非特异染色一步除外，均以TrisHCl缓冲液冲洗。实验设空白对照及第一抗体动物正常血清对照，结果均为阴性。4结果处理：依据肾小球内染色面积，进行半定量分级［2］为无染色；1为肾小球内：0微弱的和点状的染色；2为轻度和节段性肾小球内染色；3为中度节段性或弥漫性占肾小球面积50以上肾小球内染色；4为重度弥漫性肾小球内染色。5统计学处理：采用SPSS医学统计学软件，进行秩和检验。r