离心10分钟，在4℃一下保存。采集的尿是自然排尿，包括随时尿、晨尿、白天尿、夜间尿和时间尿五种。去除蛋白质常用方法：1加入与水混溶的有机溶剂（常用水溶性溶剂：乙腈、甲醇、丙酮、四氢呋喃等，比例113高速10000rmi
离心12分钟可沉淀）2加入中性盐（常用中性盐：饱和硫酸铵、硫酸钠、镁盐、磷酸盐、枸橼酸盐等，比例12同上高速离心）3加入强酸（PH低于蛋白质等电点，常用强酸：10三氯醋酸、65高氯酸、5偏磷酸等，比例106同上）4加入含锌盐及铜盐的沉淀剂（PH高于等电点，常用：CuSO4NaWO4、Z
SO4NaOH等，比例12同上）5酶解法。液固粹取法LSE一种柱色谱分离方法，将具有吸附、分配及离子交换性质的、表面积大的担体作为粹取剂填入小柱，以溶剂淋洗后，将生物样品通过，使其药物或内源性干扰物保留在担体上，用适当溶剂洗去干扰物后，再用适当溶剂将药物洗脱下来。填充柱分两类：1亲水性硅藻土2疏水性活性炭、聚苯乙烯或C18化学键合硅胶。粹取5步骤：1用有机溶剂如甲醇，预先湿润微型柱，使增加填料与待测物相互作用的表面积，并可除去可能干扰的填料残留物2用水或合适的缓冲液冲洗，除去残余的甲醇3进样，通过微型柱，废液弃去4用水或合适的缓冲液冲洗，选择性地除去将会干扰后面色谱分析的内源性杂质5用合适的溶剂如甲醇、乙腈等洗脱样品，收集，洗脱液用于后面的分析测定或进一步研究。
f【巴比妥类药物基本结构】分两部分，一母核巴比妥酸的环状丙二酰脲结构，此结构是巴比妥类药物的共同部分，决定巴比妥类药物共性二取代基部分。微溶或极微溶水易溶于乙醇等有机溶剂，含1，3二酰亚胺基团显弱酸性，能发生酮式烯醇式互变异构，在水中发生二级电离。含酰亚胺结构，与碱液共沸水解放出氨气使红石蕊变蓝。与重金属离子反应：1与银盐反应银量法：在碳酸钠碱性溶液中，生成钠盐溶解，再与硝酸银溶液反应，先生成可溶性一银盐，加入过量硝酸银则生成难溶性二银盐白色沉淀。2与铜盐反应：与铜吡啶试液反应形成稳定配位化合物，巴比妥类药物紫色沉淀，含硫巴比妥类药物绿色。3与钴盐反应4与香草醛反应生成棕红色物质司可巴比妥专属实验：与碘反应显棕黄色5分内消失，溴量法司可巴比妥与溴仅应使其褪色。巴比妥类与高锰酸钾反应在碱性中紫色还原为棕色二氧化锰。苯巴比妥专属鉴别反应：硝化反应、硫酸亚硝酸钠反应、甲醛硫酸反应。硫代巴比妥与铅白色沉淀。【巴比妥含量测定】1银量法原理，先形成可溶性一银盐，过r