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色液,用吸水纸吸干⑦镜检3、荚膜染色法:①制菌液:滴一滴黑色素于洁净的玻片上,挑取圆褐固氮菌与其混匀②加盖玻片并在油镜下观察五、报告要求1、绘图并说明大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的形状、颜色和革兰氏染色反应。
f2、绘图表示枯草芽孢杆菌的形态,注意芽孢的形状、位置及芽孢囊的形状特征。3、绘图表示圆褐固氮菌菌体和荚膜的形态。实验结果分析:1革兰氏染色中,对三区分配不太明显,最开始的两滴水的距离较近。还有可能使在染色和洗片的过程中,将一端的菌样冲到另一边,使两菌样混合。最终的染色效果不错,能良好的区分革兰氏阴性和阳性菌。2对芽孢的染色中实验结果很好,能清楚地观察到芽孢和菌体的不同颜色和位置。
3对圆褐固氮菌荚膜的染色中,菌体的黑色不明显,似乎整个细菌都是透明的,效果不是很好。里面有气泡。思考题1、使用油镜应特别注意什么?为什么要求制片完全干燥以后才可以使用油镜观察?答:①应先用低倍镜下找到物象,再转换为油镜;②加香柏油时切勿加多,下降镜筒使油镜浸入香柏油中;③各个镜面切忌用手涂抹,以免手上的油、汗沾于镜面,否则日后易发霉,腐蚀;④用二甲苯擦镜头时,用量要少,不宜久抹,以防胶粘透镜的树脂被溶解;⑤油镜工作距离甚短,故操作时要特别谨慎,切忌用眼睛对这目镜边观察边下降镜筒,由于直接在玻片上滴加香柏油,当制片时未完全干燥时,水与香柏油不互溶,影响观察。2、革兰氏染色中,那一步可以去除而不影响最终结果?为什么?答:复染这一步可以去除而不影响最终结果,因为G菌肽聚糖较厚,交联度高,类脂含量少,脱色后仍保持原初染的紫色,G菌肽聚糖薄,而脱色后原有颜色失去,若不经过复染则保持无色,因此去除复染后,紫色为G菌,无色或无法染色为G菌。3、如果涂片中观察到大量游离芽孢,很少看到芽孢囊及营养细胞,你认为是什么原因?答:a由于芽孢的壁厚,耐压力比细胞体强。因此有可能是由于在图片是用力过大,将细胞体的细胞壁压碎,从而使芽孢脱落出来的缘故。b也有可能是由于菌体培养时间过久,芽胞正处于复苏阶段,所以大多芽孢都从饱囊中游离出来。
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