酵母菌、霉菌常用培养基的配制一、目的要求
了解合成培养基、半合成培养基和天然培养基的配制原理。学习和掌握麦芽汁培养基、马铃薯葡萄糖培养基、豆芽汁葡萄糖培养基和察氏培养基的配制方法。二、基本原理麦芽汁培养基和马铃薯葡萄糖培养基被广泛用于培养酵母菌和霉菌。马铃薯葡萄糖培养基有时也可用于培养放线菌。豆芽汁葡萄糖培养基也是培养酵母菌及霉菌的一种优良培养基。察氏培养基主要用于培养霉菌观察形态用。麦芽汁培养基为天然培养基,马铃薯葡萄糖培养基和豆芽汁葡萄糖培养基二者均为半合成培养基,而察氏培养基则为合成培养基。培养基配方中出现的自然pH系指培养基不经酸、碱调节而自然呈现的pH。三、实验材料一药品葡萄搪、蔗糖、NaN03、K2HP04、KCl、MgSO47H2O,FeS04、琼脂。二仪器天平、高压蒸汽灭菌锅。三玻璃器皿移液管、试管、锥形瓶、烧杯、量筒、培养皿、玻璃漏斗等。四其他物品药匙、pH试纸、称量纸、记号笔、棉花、纱布、线绳、塑料试管盖、牛皮纸、报纸、新鲜麦芽汁、黄豆芽、马铃薯等。四、实验内容一麦芽汁培养基的配制1.培养基成分新鲜麦芽汁一般为1015波林。2.配制方法
f1用水将大麦或小麦洗净,用水浸泡612h,置于15℃阴凉处发芽,上盖纱布,
每日早、中、晚淋水一次,待麦芽伸长至麦粒的两倍时,让其停止发芽,晒干或烘
干,研磨成麦芽粉,贮存备用。
2取一份麦芽粉加四份水,在65℃水浴锅中保温34h,使其自行糖化,直至
糖化完全检查方法是取05ml的糖化液,加2滴碘液,如无蓝色出现,即表示糖化
完全。
3糖化液用46层纱布过滤,滤液如仍混浊,可用鸡蛋清澄清用一个鸡蛋清,
加水20m1,调匀至生泡沫,倒入糖化液中,搅拌煮沸,再过滤。
4用波美比重计检测糖化液中糖浓度,将滤液用水稀释到1015波林,调pH
至6.4。如当地有啤酒厂,可用未经发酵,未加酒花的新鲜麦芽汁,加水稀释到
1015波林后使用。
5如配固体麦芽汁培养基时,加入2%琼脂,加热融化,补充失水。
6分装、加塞、包扎。
7高压蒸汽灭菌100Pa灭菌20mi
。
(二马铃薯葡萄糖培养基的配制
1、培养基成分
马铃薯
20g
葡萄糖
2g
琼脂
152g
水
100ml
自然pH
2.配制方法
1配制20%马铃薯浸汁取去皮马铃薯200g,切成小块,加水1000m1。80℃
浸泡lh,用纱布过滤,然后补足失水至所需体积。100Pa灭菌20mi
。即成20%马
铃薯浸汁,贮存备用。
(2配制时,按每100m1马铃薯浸汁加入2g葡萄糖,加热煮沸后加入2g琼脂,
继续加热融r