或压力输送至分析体系，在进入色谱柱之前通过进样器将样品导入，流动相将样品带人色谱柱，在色谱柱中各组分依照分配系数、吸附力大小、带电性质，乃至分子量大小的差异而被分离，并依次随流动相流至检测器，将检测到的信号送至数据系统记录、处理或保存。蛋白质在物理、化学及功能上的差异为蛋白质的分离检测提供了基础，蛋白质的大小，形状，电荷，疏水性，功能等特性都可以作为不同影响因素来分离蛋白质。A．高效亲和色谱高效亲和色谱（HPAFC）可以从复杂的混合物中直接分离到目标蛋白质，尤其是一些疫苗、糖蛋白和抗体等蛋白质类物质的分离。也可以分离纯化酶、抗体、抗原、结合蛋白、受体蛋白、辅助蛋白、变性蛋白、化学改性蛋白等，因为亲和色谱分离蛋白质的基本反应就是抗原抗体反应。B．高效离子交换色谱高效离子交换色谱HPIEC是基于离子交换树脂上可解离的离子与流动相中具有相同电荷的溶质离子进行可逆交换，根据这些离子对交换剂具有不同的亲和力而将他们分离。而蛋白质正好有等电点的差异，在不同pH值溶液中带电性质会发生变化。HPIEC是根据蛋白质分子在一定pH值和离子强度条件下所带电荷的差异进行分离的方法。这种技术已经成功地应用于分离大多数的水溶性蛋白质，包括水解以后的多肽乃至氨基酸，并且当选择流动相的pH值合适时，能维持蛋白质的生物活性。根据蛋白质的pH不同，又可分为阴离子交换色谱和阳离子交换色谱。大多数蛋白质在生理pH值68时，都带负电荷，因此常用阴离子交换色谱来分离采用阴离子交换色谱分离乳蛋白时，一般是有针对性的分离某一种蛋白质时的效果较好，如分离骨桥蛋白时，纯度可以达到85％以上，但是如果要将大多数常量蛋白质都同时得到分离，则必须与其他手段联用。对于一些碱性蛋白例如乳品中一些等电点较高的蛋白质采用强阳离子色谱的分离手段则更为有效。C高效疏水色谱高效疏水色谱是用来分离构象不稳定蛋白质的技术之一，其分离机制是用水性缓冲液代替了
f有机溶剂；以键合氟化物作固定相，用SDS或CTAB作流动相的胶束高效液相色谱中，胶束提供了一个溶质溶解的非均相环境，可用于蛋白质的分离近年来，人们将非线性色谱论应用于蛋白质分离中，更加完善了高效液相色谱技术。在实际应用中，特别是复杂样品，通常采用几种分离模式结合使用才能获得理想的目标产物二．紫外吸收法在蛋白质测量中的应用蛋白质分子中，酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸残基的苯环含有共轭双键，使蛋白质具有吸收紫r