相载体,在载体上进行免疫酶染色,底物显色后,通过定性或定量分析有色产物量,从而确定样品中待测物质含量。目前的分类方法众多。主要技术类型有双抗体夹心法、间接法、捕获法、竞争法。这种技术具有可定量、反应灵敏准确、标记物稳定、适用范围宽、结果判断客观、简便完全、检测速度快以及费用低等特点,且同时可进行上千份样品的分析。
3、代谢学
31阻抗法。阻抗法的原理为:微生物在生长繁殖过程中,会使培养基中的电惰性底物代谢成活性底物,从而增加培养基中的电导性,使培养物中的阻抗降低;通过检测培养基的电阻抗的变化情况,从而对检测的细菌做鉴定。阻抗法具有高敏感性、特异性、快反应性和高度重复性,非常适于临床样本细菌检测、食品质量与病原体检测、工业生产中的微生物过程控制及环境卫生细菌学研究。
32放射法。放射测量法radiometry,RM是多种物理、化学诊断新技术。其原理是根据细菌在生长繁殖过程中可利用培养基中的“C标记的碳水化合物或盐类的底物,代谢产生CO,然后通过仪器测量CO的含量增加与否,来确定样品中有无细菌存在。这一方法具有快速、准确度高和自动化等优点。适合大批量样品的细菌数检验,以及各类物品的无菌监测。
4、PCR
PCR技术是在1971年首先提出的。该技术即聚合酶链式反应,也称无细胞克隆系统,是1985年诞生的一项DNA体外扩增技术。通过扩增某些难以培养的微生物相应的DNA片段,检测扩增产物含量,从而快速地对食品中致病菌进行检测。检测时,首先在高温下95℃使得蛋白质变性,DNA双链变成单链;再迅速降温55℃,每条DNA单链退火,这就是所谓的热循环。之后温度重新上升到95℃,开始新的循环。经一套扩增循环21到31次将1个单分子DNA扩增到107分子。整个过程可以在1h内通过自动热量循环器完成。这种测定方法的优点是测定结果迅速、灵敏度和特异性高、检测成本低;但其存在的最大问题在于PCR产品的污染M。
5、“干片”法
“干片”法是集现代化学、高分子科学、微生物学于一体的检测方法。它主要是利用无毒的高分子材料为培养基载体,能快速、定性和定量检测试纸和胶片的食品微生物。这种方法已经达到作为定量常规法的水平。对有些项目的测定,几乎可与标准方法相媲美。由于准确度和精确度高,这种方法对于测定少量检品,既不需要配制试剂,操作又简便快速,而且易于消毒保存,便于运输,携带方便,价格低廉,可随时进行;加之除“干片”外无其他任何废液废物,大大减少或消除对环境的污染r