从土壤中筛选产淀粉酶的细菌菌株
学生:石淑珍学号:091201210734000
河西学院生命科学与工程系,甘肃张掖
总述:查资料可知在土壤中从在多种可产淀粉酶的菌种,并且芽孢杆菌是不错的菌种,因此,采集土样,对土壤中的芽孢杆菌进行分离纯化,就可得到理想菌株。在菌株的初选过程中采用涂布平板法,把配好的培养基灭菌后倒成平板,再把稀释好的土样涂布到平板上,置于适宜的条件下进行培养。24h后对其进行鉴定,鉴定的方法是在培养好的菌株上滴加淀粉溶液,周围出现透明圈的为产淀粉酶的菌株,并且透明圈与菌落直径的比值越大,说明菌种越纯或菌株的生产性能越高。然后再进行复选,复选时采用平板划线法或斜面划线法,挑取的菌落为透明圈与菌落直径比值较大的,进行多步筛选就可得到较纯的菌株。实验流程
采集土样
制备菌悬液
配制培养基
菌株的初选(涂布平板)
鉴定
平板划线纯化
鉴定
线面划线纯化
f待测数据:透明圈直径
菌落直径
摘要:查资料可知枯草芽孢杆菌能产生淀粉酶,因此从河西学院的土壤中筛选产淀粉酶的细菌菌株,利用五点取样采集土样,再用涂布平板法对菌株进行初步培养,在培养出的菌落周围滴淀粉溶液,对周围出现透明圈的菌落在进行平板划线培养,在地如淀粉溶液鉴定,对周围出现透明圈的菌落进行斜面划线培养,就可得到较纯的产淀粉酶的菌株。关键词:淀粉酶细菌枯草芽孢杆菌引言:芽孢杆菌是人类发现最早的细菌之一。早在1835年,Ehre
berg所描述的“Vibriosubtilis”即是现在大家熟悉的“枯草芽孢杆菌”,它是由Coh
于1872年正式命名的,现作为芽孢杆菌属Bacillaceae的模式菌株1。从生物学特性来讲,枯草芽孢杆菌具有典型的芽孢杆菌特征,其细胞呈直杆状,大小0812μm×1540μm,单个,革兰氏染色阳性,着色均匀,可产荚膜,运动周生鞭毛;芽孢中生或近中生,小于或等于细胞宽,呈椭圆至圆柱状;菌落粗糙,不透明,扩张,污白色或微带黄色;能液化明胶,胨化牛奶,还原硝酸盐,水解淀粉,为典型好氧菌2。1997年,Ku
stF等人首先完成了枯草芽孢杆菌的完整基因组序列测定,并将结果发表在《Nature》杂志上3。工业酶的生产是工业微生物发酵的重要组成部分。据来自BBC的统计数字,2004年全球酶的交易额达到200亿美元153亿欧元,其中食品酶占29,饲料酶占15,一般的工业酶占56。枯草芽孢杆菌是当今工业酶生产应用最广泛的菌种之一,据不完全统计,枯草芽孢杆菌所产的酶占整个酶市场的50。由于其产酶量高、种类多、安r