HE染色法是苏木精(hematoxyli
)和伊红(eosi
)的首个字母缩写。苏木精是碱性染料,使细胞核染色质和胞质内的核糖体呈紫蓝色。伊红是酸性染料,使细胞质和细胞外基质中带较强碱基的蛋白质成份着红色。常规he染色步骤:1二甲苯(Ⅰ)15mi
2二甲苯(Ⅱ)15mi
(3)二甲苯:无水乙醇112mi
4100乙醇(Ⅰ)5mi
5100乙醇(Ⅱ)5mi
680乙醇5mi
7蒸馏水5mi
8苏木精液染色5mi
9流水稍洗去苏木精液13s101盐酸乙醇13s11稍水洗1030s12蒸馏水过洗12s1305伊红液染色13mi
f14蒸馏水稍洗12s1580乙醇稍洗12s1695乙醇(Ⅰ)23s1795乙醇(Ⅱ)35s18无水乙醇510mi
19石炭酸二甲苯510mi
20二甲苯(Ⅰ)2mi
21二甲苯(Ⅱ)2mi
22二甲苯(Ⅲ)2mi
23中性树胶封固注:①第(11)、(12)步可省去,(13)步冲水时间需延长至2030mi
。②第(21)步如果不用石炭酸二甲苯,可改用无水乙醇。冷冻切片HE染色步骤:(1)冰冻切片固定10~30s(2)稍水洗1~2s(3)苏木精液染色(60℃)30~60s
f(4)流水洗去苏木精液5~10s(5)1盐酸乙醇1~3s(6)稍水洗1~2s(7)促蓝液返蓝5~10s(8)流水冲洗15~30s(9)05曙红液染色30~60s(10)蒸馏水稍洗1~2s(11)80乙醇1~2s(12)95乙醇1~2s(13)无水乙醇1~2s(14)石炭酸二甲苯2~3s(15)二甲苯(Ⅰ)2~3s(16)二甲苯(Ⅱ)2~3s(17)中性树胶封固。
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