液浇注在水平放置的载玻片上，每片约3ml。静置约510mi
即能凝固（天热时需延长时间，也可放入冰箱中数分钟加速凝固）。在即时凝固的凝胶板一端约2cm处用烫槽器加热后稍用力下压使之下陷接近玻片，切忌勿透，用滤纸片吸干槽中水分。2．加样用微量加样器取预染血清约15μl注入凝胶板加样槽中。3．电泳将已加入预染血清的凝胶板水平移至电泳槽中，使加样端接在阴极一侧，用电泳槽缓冲液把四层纱布浸湿做成“引桥”，敷于胶板的两端，各搭住凝胶板约1cm左右，“引桥”的另一端浸于电泳槽内的巴比妥缓冲液中，使血清样品扩散进入凝胶，5mi
后接通电源，电压120130V，电流约为34mA凝胶板，电泳4050mi
，待最前端区带电泳至玻片2／3处时即可终止电泳。4．固定将电泳后的凝胶板浸入固定液中固定约20mi
，以增强区带的不溶性和加强与染料的结合力。5．漂洗与烘干将固定后的凝胶板用自来水漂洗数次，然后置于80℃烘箱中烘干成薄片状保存或进行扫描定量。6．定量测定（1）扫描定量：将已烘干的凝胶片直接放到吸光度扫描仪上，通过扫描得出各种脂蛋白的百分比含量。
f（2）比色定量：将电泳后凝胶板上各区带切下，另外取相当于区带宽窄的无色凝胶作为空白对照，分别移入盛有3ml蒸馏水的试管内，将各管同时置于沸水浴中5mi
溶解为透明澄清的溶液，稍冷却，用分光光度计，选波长600
m，分别记录各管吸光度值。【计算】血清某种脂蛋白占血清总脂蛋白的百分比，按以下公式计算：
【注意事项】1．电泳样品应为新鲜的空腹血清。2．加热溶化琼脂糖时，须防止水份蒸发过多。琼脂糖凝胶最好随用随制，以免凝胶表面干燥，影响分离效果。3．点样口要大小适宜，边缘整齐、光滑，否则会影响电泳图谱。4．琼脂糖凝胶的浓度如果大于1，β脂蛋白和前β脂蛋白不易分开；浓度过低，则凝胶的机械强度太低，不易操作。5．浇注琼脂糖凝胶板要尽量使厚薄均一，否则会影响脂蛋白的分离效果。6．将凝胶板放入电泳槽中，应切记与电力线平行、样品端置阴极、引桥纱布不能搭在样品上。7．如果用一形状大小和小槽一样的有机玻璃片，在琼脂糖凝胶凝固前固定于适当位置上，当凝固后取出有机玻璃片，凝胶板上即留下小槽可直接加样。8．正常人空腹血清各种脂蛋白百分比含量参考值见表311。表311正常人空腹血清各种脂蛋白百分比含量种类β脂蛋白前β脂蛋白α脂蛋白【思考题】1．琼脂糖凝胶电泳的原理的优缺点是什么？含量％531±51151r