人α葡萄糖苷酶(αglucosidase)酶联免疫分析试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供研究使用。
检测范围:7UL200UL
96T
使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中α葡萄糖苷酶(αglucosidase)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人α葡萄糖苷酶(αglucosidase)水平。用纯化的人α葡萄糖苷酶(αglucosidase)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入α葡萄糖苷酶(αglucosidase),再与HRP标记的α葡萄糖苷酶(αglucosidase)抗体结合,形成抗体抗原酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的α葡萄糖苷酶(αglucosidase)呈正相关。用酶标仪在450
m波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人α葡萄糖苷酶(αglucosidase)浓度。试剂盒组成12345630倍浓缩洗涤液酶标试剂酶标包被板样品稀释液显色剂A液显色剂B液20ml×1瓶6ml×1瓶12孔×8条6ml×1瓶6ml×1瓶6ml×1瓶789101112终止液标准品(400UL)标准品稀释液说明书封板膜密封袋6ml×1瓶05ml×1瓶15ml×1瓶1份2张1个
标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤1标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。200UL100UL50UL25UL125UL5号标准品4号标准品3号标准品2号标准品1号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液
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加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、
f待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空r