将培养皿打开一条缝隙右手将沾有菌液的接种环迅速伸入平板内划线三至五条注意用力不能过大不能将培养基划破⑦灼烧接种环冷却从第一区域划线的末端开始往第二区域内
f划线重复以上操作在第三、第四、第五区域内划线注意不要将最后一个区域的划线与第一区域相连【生】理解过程【师】课件演示划线操作【生】观看操作【师】最后划线结束后要将接种环在酒精灯火焰上灼烧杀死细菌将平板倒置放置培养箱中培养【视频】平板划线法【生】观看加深记忆理解【师】培养几天之后我们就会得到长着细菌的培养基【投影】图片【一制备牛肉膏蛋白胨固体培养基】【师】首先学习第一部分的内容制备牛肉膏蛋白胨固体培养基制作培养基得知道培养基成分及培养基配方【投影】配方1000ml【师】该培养基由4个组分构成拿到配方后我们应如何进行配置呢分为哪几个步骤请大家找到并勾划【生】计算称重溶化灭菌倒平板【师】课本上给出的步骤不够全面下面我们的分析过程与之稍有不同请大家认真注意听讲【分析】
f计算根据所需要培养基数量计算所需要的体积由体积根据配反比例计算所需用量。如需要100ml培养基根据配方数据各组分缩小10倍即得各组的用量牛肉膏05g蛋白胨1g
acl05g琼脂2g称重制备100ml培养基各组分用量都比较少需准确称取各种成分实验室常用的精确度较高的称量仪器是电子天平它的精确度可达00001g即01mg小数点后四位各组分中蛋白胨为粉末状
acl、琼脂都容易称量但牛肉膏比较粘稠可用玻棒或药匙挑取放在称量纸上称量图片注意称取牛肉膏和蛋白胨时动作要迅速称后要及时盖上瓶盖为什么【生】防止牛肉膏和蛋白胨吸收空气中的水分3、溶化注意溶化药品的顺序否则有些培养基容易产生沉淀加水加热溶化牛肉膏称量时用称量纸称取现在直接将称量纸一同放入烧杯中溶化后取出称量纸丢弃加入蛋白胨和
acl玻棒搅棒溶解加入琼脂继续加热使其溶化并用玻棒搅棒为什么【生】防止琼脂糊底导致烧杯破裂最后用蒸馏水定容至100ml
f调pH①用1moll的
aoh溶液调节ph至ph76左右②调节ph常用ph试纸或者ph测定仪5、灭菌①将烧杯中的培养基转移至三角锥形瓶中塞上棉花塞包上牛皮纸放入高压蒸汽灭菌锅内灭菌1530mi
②将培养皿用报纸包紧放入干热灭菌箱内灭菌2h③灭菌结束取出培养基、培养皿放在干净的位置待用6、倒平板待培养基冷却到50℃在酒精灯火焰附近倒平板【思考】你用什么方法估计温度【生】用手摸r