防止琼脂糊底导致烧杯破裂最后用蒸馏水定容至100ml调pH①用1moll的
aoh溶液调节ph至ph76左右②调节ph常用ph试纸或者ph测定仪5、灭菌①将烧杯中的培养基转移至三角锥形瓶中塞上棉花塞包上牛皮纸放入高压蒸汽灭菌锅内灭菌1530mi
②将培养皿用报纸包紧放入干热灭菌箱内灭菌2h③灭菌结束取出培养基、培养皿放在干净的位置待用6、倒平板待培养基冷却到50℃在酒精灯火焰附近倒平板【思考】你用什么方法估计温度【生】用手摸【师】用手触摸锥形瓶感觉温度刚好不烫手下面我们学习如何倒平板【倒平板操作】【师】看P17图文解说首先大家气度一遍步骤【生】读书【分析】①将灭菌培养基放在火焰旁边的桌上右手拿着装有培养基的锥形瓶左手拔出棉塞
f②右手拿锥形瓶使瓶口迅速通过火焰【思考】为什么要拖过酒精灯火焰③用左手将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙右手将锥形瓶内的培养基倒出1020ml左手立即盖上皿盖④等待平板冷却凝固约510mi
将平板倒置【思考】为什么要倒置【分析】平板冷凝后皿盖上会结出水珠凝固后的培养基表面温度比较高将平板倒置可以防止水珠落入培养基又可以避免培养基中水分过快地挥发【讨论4】在到平板的过程中如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位这个平板还能用来继续培养微生物吗【生】不能【师】因为空气中的微生物可能会在皿盖与皿底之间的培养基上滋生造成污染【生】笔记【师】倒平板之后配置培养基的操作还没有结束我们需要进行下一步7、无菌检查将培养基放置在37℃的恒温箱中培养2448h没有长出细菌即可进行下面的操作【生】笔记二、纯化大肠杆菌
f【师】纯化大肠杆菌需要用到微生物的分离与纯化技术即从混杂菌种中获得只含一种或一株微生物的过程可利用固体培养基将混杂的细菌分散或稀释成单个细胞使其生长繁殖成单个菌落首先请大家阅读课本找到微生物的接种技术有哪几种【生】平板划线法、稀释涂布平板法、斜面接种法、穿刺接种法【师】下面我们重点学习平板划线法、稀释涂布平板法首先学习平板划线法【平板划线法】【师】请大家气度步骤【生】读书【分析】点燃酒精灯后面所有操作都在酒精灯火焰附近进行①操作的第一步必须首先将接种环在酒精灯火焰上灼烧直接烧至红②在火焰附近冷却接种环并打开盛有菌液的试管棉塞③将试管口通过酒精灯的火焰④将已经冷却的接种环伸入菌液中沾取一环菌液⑤将试管口通过酒精灯的火焰并塞上棉塞⑥左手r