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解脂假丝酵母自溶条件及神经酰胺的提取
概要:概要:采用细胞自溶法对影响解脂假丝酵母33Mca
didalipolytlca细胞中神细胞中神经酰胺含量的条件进行了研究。分别应用薄层色谱(经酰胺含量的条件进行了研究。分别应用薄层色谱(TLC)方法和高效液相)色谱蒸发光散射器(色谱蒸发光散射器(HPLCELSD)对其进行定性和定量分析,结果表明:)对其进行定性和定量分析,结果表明:解脂假丝酵母的最佳自溶条件为:自溶时间24小时,小时,PH80,解脂假丝酵母的最佳自溶条件为:,自溶温度为50℃。℃
真核细胞中普遍含有神经酰胺,作为一种信息和结构分子存在于细胞膜中,真核细胞中普遍含有神经酰胺,作为一种信息和结构分子存在于细胞膜中,它可以分子存在于细胞膜中保持水分以及促进水分的吸收,从而起到延缓衰老,抗皱纹的功效。从酵母中提取神经保持水分以及促进水分的吸收,从而起到延缓衰老,抗皱纹的功效。延缓衰老酰胺是一种方便和经济的方法,且得到的产品具有天然活性。酰胺是一种方便和经济的方法,且得到的产品具有天然活性。酵母细胞壁破碎的方法很多,超声波破碎发等破碎发等。酵母细胞壁破碎的方法很多,如自溶法高压匀浆法超声波破碎发等。我们研究中神经酰胺含量的影响,方法和结果如下:了自溶发对解脂假丝酵母33M中神经酰胺含量的影响,方法和结果如下:1材料方法菌种:解脂假丝酵母33M由清华大学微生物实验室保存。菌种:由清华大学微生物实验室保存。培养基:培养基。培养基:YPD培养基。试剂:公司提供。试剂:神经酰胺标样V有广州cosmoferm公司提供。2方法解脂假丝酵母自溶步骤:斜面培养基,℃小时,解脂假丝酵母自溶步骤:33M接种YPD斜面培养基,30℃培养24小时,将斜面菌种接种到100毫升YPD液体培养基,200rmim30℃24h,将10ml液体菌种转接于液体培养基,℃,100mlYPD液体培养基,200rmim30℃培养24h,6000rmim离心20mim,用蒸馏水液体培养基,℃,,悬浮细胞,次得到酵母湿细胞,倍蒸馏水制成菌悬液,悬浮细胞,洗2次得到酵母湿细胞,加2倍蒸馏水制成菌悬液,用2N
aOH调PH小时。倍体积的氯仿分钟,为80,50℃水浴自溶24小时。加入8倍体积的氯仿50摄氏度水浴30分钟,加入4,℃分钟,倍体积的水使氯仿:甲醇:倍体积的甲醇50℃水浴30分钟,加入3倍体积的水使氯仿:甲醇:水的体积为℃84310000rmi
离心10mi
倒出上清液,细胞残渣重新提取一次。把第一二次抽提倒出上清液,细胞残渣重新提取一r
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