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液相色谱仪:具有C18柱(如39×150mm,5um或类似的分析柱)和UV检测器或二极管阵列检测器。59气相色谱质谱联用仪:装有弱极性或非极性的毛细管柱的气相色谱仪和具有电子轰击离子源和检测器。6样品的制备取具有代表性的饲料样品,用四分法缩减分取200g左右,粉碎过045mm孔径的筛,充分混匀,装入磨口瓶中备用。7分析瞒步骤71提取:称取样品5g,精确至0001g,置于100mL三角瓶中,准确加入提取液(41)50mL,振摇使全部润湿,放在超声水浴中超声提取15mi
,期间每5mi
用手振摇一次。超声结束后,手摇至少10sec,并取上层液于离心机上4000rpm下离心10mi
。72净化:准确吸取上清液1000mL,置150mL分液漏斗中滴加2molL氢氧化钠溶液(42),充分振摇,将PH调至1112,溶液用30、25mL乙醚萃取两次,令醚层通过无水硫酸钠干燥,用少许乙醚淋洗分液漏斗和硫酸钠,并用乙醚定容至50mL。准确吸取2500mL于50mL烧杯中,置通风橱内、50℃加热块或沙浴上蒸干,残渣溶于200mL002molL盐酸溶液(45),取100mL置于预先已分别用1mL甲醇和1mL去离子水处理过的SPE小柱上,用注射器稍试加压,使其过柱速度不超过1mLmi
,再先后分别用1mlSPE淋洗液1(4631)和2(4632)淋洗,最后用甲醇洗脱,洗脱液置70±5℃沙浴上、用氮气吹干。73测定731HPLC法(筛选法)7311于净化、吹干的样品残渣中准确加入100200mL002molL盐酸溶液,充分振摇、超声,使残渣溶解,必要时过045um的滤膜,清液上机测定,用盐酸克伦特罗标准系列进行单点或多点校准。7332HPLC测定参数设定:色谱柱:C18,4um。柱温:室温。流动相:005磷酸水溶液:乙腈100:12,流速:10mlmi
。检测器:二极管阵或UV检测器。检测波长:210
m或243
m。进样量:2050uL。7333定性定量方法定性方法:除了用保留时章定性外,还可用二极管阵列测定盐酸克伦特罗紫外光区的特征光谱,即在210、243和296
m有三峰值依次变低的吸收峰。
f定量方法:积分得到峰面积,而后用单点或多点校准法定量。732GCMS法(确证法)7321衍生:于净化、吹干的样品残渣中加入BSTFA50ul,充分涡旋混合后,置70±5℃烘箱中,衍生反应30mi
。凉至室温后即可上机测定。同时用盐酸克伦特罗标准系列做同步衍生。7322GCMS测定参数设定:载气:He,柱头压:7psi。进样口温度:260℃。进样量:1uL,不分流。柱温程序:70℃保持1mi
,25℃mi
速度升至200℃,200℃保持6mi
,以于再以25℃mi
的速度升至280℃并保持2mi
。EI源电子轰击能:70er
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