二甲基氨基吡啶DMAP溶液和50L1蒽腈1AN溶液，在涡旋混合器上混匀1mi
，
50℃反应15mi
，在冰水中冷却10mi
后取出，50℃下氮气吹干，用10ml流动相溶解，
HPLC测定。
56液相测定
561液相色谱条件
色谱柱：150mm（长）×46mm（直径），填料粒径5μm
流动相：乙腈水（7525）；
流速：125mLmi

柱温：35℃
进样量：50L
2
f文件编号：HAMKOI2015
版本号：10
荧光检测器：激发波长：381
m
生效日期：2015年12月30日发放号：
发射波长：470
m
562色谱定量
分别取相同体积样液和标准工作液注入高效液相色谱仪，在上述色谱条件下测定试
样的响应值（峰高或峰面积），以标准品浓度为横坐标，峰面积为纵坐标做标准曲线，
将未知样本中T2毒素的峰面积带入标准曲线，得到试样中T2毒素的浓度，标准品色
谱图参考下图：
mV200检测器AEx381
mEm470
m175150125100
755025
0
00
25
50
57注意事项
数据文件名T2500ppblcd样品名T2500ppb
T2
75
100
125
150
175
200
225
250
275
mi

附图：T2500ppb标准品液相图谱
使用前，免疫亲和柱需回至室温（22～25℃）。
亲和柱2～8℃储存，不得冻存。
不要使用过了有效日期的免疫亲和柱。
取样量：根据需要可以适当增加或减少取样量，注意提取液量要相应改变。
柱容量：柱容量是2000
g，当样本中待检毒素的含量除以稀释倍数高于柱容量时，
需要适当降低上样液的体积，重新检测。
pH：亲和柱的上样溶液pH需在6～8之间，若偏离此范围需要用盐酸或氢氧化钠调
节pH。
上机检测时的溶剂与流动相保持一致可以消除溶剂效应的影响。
T2毒素可致癌，应戴手套操作。
使用过的容器及标准品溶液最好用次氯酸钠溶液（5VV）浸泡过夜。
6、相关文件
《免疫亲和柱检验标准》
《免疫亲和柱检验操作规程》
《岛津液相色谱仪标准操作规程》
《安捷伦液相色谱仪标准操作规程》
3
f文件编号：HAMKOI2015
7、相关记录NA
8、附件NA
9、修改历史记录
编号变更类型
版本号：10
生效日期：2015年12月30日发放号：
修改条款及主要内容
修改人
修改日期
01
A
NA
变更类型：A新起草M修订
魏丹丹
2016329
4
fr