夹心ELISA法检测牛奶过敏原蛋白的最低检出限可达25μgL。此外,还有用此法对大豆和花生过敏原蛋白进行检测的相关报道,也能达到相当的检测水平。正因为ELISA法的诸多优点,已经实施过敏原法规标准的欧盟、美国、加拿大和日本等国家均推荐ELISA法为过敏原检测方法,而且现在商业食物过敏原检测试剂盒绝大多数也都是基于ELISA技术,在西方发达国家其应用已经比较普及。为了进一步提高ELISA法的灵敏度与准确度,近年新兴了一种将ELISA与电感耦合等离子质谱ICPMS相结合的方法,即ELISAICPMS法,在此方法中,用稳定同位素取代酶对二抗进行标记,然后可通过质谱进行定量分析。根据报道,用此法可以在1g的谷类食品混合物中检测出2μg的花生过敏原。
青岛科标检测研究院
f12RASTEAST及RASTEAST抑制实验自从IgE成功纯化及抗IgE抗体成功制备后,放射过敏原吸附实验RAST与酶标记过敏原吸附实验EAST检测技术就建立起来,其基本原理都是在固相载体上使特异性IgE抗体与食物过敏原结合,然后进行检测,现在已是一种标准化的食物过敏原检测方法,使用广泛。在此基础上又建立了放射过敏原吸附抑制实验RAST抑制实验和酶标记过敏原吸附抑制实验EAST抑制实验,可对食物过敏原进行定量测定,其在食物过敏原检测中获得了广泛的应用。RASTEAST抑制实验的优点是可以实现全自动操作,避免了人为操作带来的误差;缺点是对人血清的依赖,人血清的个体差异性限制了这两种方法在食物过敏原定量检测中的应用。13火箭电泳RIE法RIE法是将含有已知抗体的琼脂制成琼脂板,冷凝后,在液板上的阴极端挖一排小孔,孔中分别加入一定量的待检样品及不同稀释度的标准抗原,进行电泳。抗原向阳极移动,并与抗体结合。在抗原、抗体比例适当的部位形成锥形沉淀峰,其形状如火箭,该峰的高度与抗原量成正比,可快速测出标本中过敏原的含量。据报道用此方法检测了不同食品中鸡蛋、牛奶和花生蛋白的含量。RIE的优点是检测速度快,缺点是制胶操作和染色过程比较繁琐。14组胺释放实验致敏靶细胞被食品过敏原蛋白激发后会释放出组胺,然后用放射免疫法、荧光测定法检测组胺含量,再与合适参照进行比较,就可以对食品过敏原蛋白进行测定。其中阳性参照与阴性参照一般分别为抗IgE抗体与样品介质,这样可以排除在实验中非特异性组胺释放造成的影响。现已有通过体外组胺释放实验对大豆、牛奶和鸡蛋过敏原蛋白经行检测的报道,都表现出了很高的灵敏度与很好的重现性。15生物传感器r