食物过敏原蛋白的定量检测方法
现在食物过敏现象越来越引起人们的重视，在西方发达国家，1～2的成人与5～8的儿童都存在食物过敏现象，其中儿童主要以牛奶和鸡蛋过敏为主，而成人主要以海鲜贝壳类食物过敏为主。有明显迹象表明，食物过敏现象在近几年有严重的趋势。在世界卫生组织报告的威胁人类健康的因素中，食物过敏排在第4位，并且现在仍然没有彻底有效的治疗食物过敏的方法。在食品加工工业中，原料里几乎不可避免的含有各种致敏蛋白，例如鸡蛋、牛奶、花生等，食物过敏患者想完全避免接触致敏物非常困难。为确保食品标签的准确性和消费者的安全，可靠、定量的过敏原蛋白检测方法是非常必要的。因为食物过敏原在食品中的含量较少并可能包裹于食品基质中，所以食物过敏原的检测十分困难。极少量的过敏原蛋白即可引起严重的过敏反应，这对食物过敏原蛋白定量检测的灵敏度和准确性提出了更高的要求。青岛科标检测研究院生物实验室，拥有丰富的食品过敏原检测经验，可检测原材料食品和加工食品中的过敏源蛋白质，为食品生产商减少安全风险，保障食品安全、维护消费者健康。本文分别对基于单个蛋白如ELISA法和定量蛋白质组学的食物过敏原定量检测方法进行综述，单个蛋白检测技术的发展已经较为成熟，但尚不足以满足实际需要，而蛋白质组学方法的运用，为实现对多种食品过敏原同时进行高通量、高灵敏度的快速检测提供了新的手段。1、基于单个蛋白的食物过敏原定量检测基于单个蛋白的食物过敏原定量检测方法主要为免疫学方法，除传统免疫学方法外，生物传感器也被应用于检测当中。目前主要的过敏原定量检测方法主要包括如下几类：11酶联免疫吸附实验ELISA法随着全自动酶标分析仪的普及，ELISA法在上世纪90年代末期发展迅速，其特异性和灵敏度也有了很大的提高，大大扩展了其在食品检测领域中的应用。ELISA法是一种免疫测定技术，基础是抗原或抗体的固相化及酶标记。在最常用的双抗体夹心ELISA法中，首先将抗体结合在固相载体表面，使其与样品蛋白反应，然后加入酶标记的二抗来检测已结合于固相载体表面的样品蛋白。结合于固相载体表面的样品蛋白越多，酶标记二抗的显色反应就越强，由此进行样品蛋白的定量分析。目前，在食物过敏原的各种检测方法中，ELISA法是使用范围最广的检测方法，多采用双抗体夹心法，具有特异性高、敏感性强、快速方便、设备投资小等优点，可以实现比较精确的定量检测。根据报道，使用双抗体r