双键，所以蛋白蛋白质中酪氨酸和色氨酸残基的苯环含有共轭双键，275280
m具有一个吸收紫外吸收高峰。在一定浓度范围内，质溶液在275280
m具有一个吸收紫外吸收高峰。在一定浓度范围内，蛋白质溶液在最大吸收波长处的吸光度与其浓度成正比，从朗伯蛋白质溶液在最大吸收波长处的吸光度与其浓度成正比，服从朗伯比耳定律，因此可作定量分析。耳定律，因此可作定量分析。该法测定蛋白质的浓度范围为0110mgmL。0110mgmL。（2）由于不同蛋白质中酪氨酸和色氨酸的含量不同，所处的微环境由于不同蛋白质中酪氨酸和色氨酸的含量不同，也不同，所以不同蛋白质溶液在280
m的光吸收职也不同。的光吸收职也不同。据初步统计，也不同，据初步统计，浓度为10mgmL的1800种蛋白质及蛋白质亚基在280
m的吸光度在03之间，125051。0330之间，平均值为125051。所以此种方法测量的准确度差一点。一点。若样品中含有嘌呤、嘧啶等核酸类吸收紫外光的物质，280
m在（3）若样品中含有嘌呤、嘧啶等核酸类吸收紫外光的物质，
f处来测量蛋白质含量时，处来测量蛋白质含量时，会有较大的干扰。会有较大的干扰。核酸在260
m处的光吸收比更强，但蛋白质却恰恰相反，280
m更强，但蛋白质却恰恰相反，因此可利用280
m及260
m的吸收差来计算蛋白质的含量。常用下列经验公式计算：差来计算蛋白质的含量。常用下列经验公式计算：蛋白质浓度（mgmL）蛋白质浓度（mgmL）145A280074A260处测得的吸光度值A280和A260分别为蛋白质溶液在280
m和260
m处测得的吸光度值还可以通过下述经验公式直接计算出溶液中的蛋白质的含量：还可以通过下述经验公式直接计算出溶液中的蛋白质的含量：蛋白质浓度（mgmL）蛋白质浓度（mgmL）FA280D1d测得的吸光度值；其中A280为蛋白质溶液在280
m处测得的吸光度值；为石英比色皿的d厚度（cm）为溶液的稀释倍数；厚度（cm）D为溶液的稀释倍数；F为校正因子200有强的紫外吸收。（4）蛋白质的肽键在200250
m有强的紫外吸收。其光吸收强度在一定范围与浓度成正比，其波长越短，光吸收越强。一定范围与浓度成正比，其波长越短，光吸收越强。若选用215
m可减少干扰及光散射，光吸收差值与单一波长测定相比，少干扰及光散射，用215
m和225
m光吸收差值与单一波长测定相比，可减少非蛋白质成分引起的误差，因此，对稀溶液中蛋白质浓度测定，可减少非蛋白质成分引起的误差，因此，对稀溶液中蛋白质浓度测定，光吸收差法。常用r