紫外分光光度法测定蛋白质含量200702071704
一、实验目的
1学习紫外分光光度法测定蛋白质含量的原理。1学习紫外分光光度法测定蛋白质含量的原理。学习紫外分光光度法测定蛋白质含量的原理2掌握紫外分光光度法测定蛋白质含量的实验技术。2掌握紫外分光光度法测定蛋白质含量的实验技术。掌握紫外分光光度法测定蛋白质含量的实验技术3掌握TU紫外3掌握TU1901紫外可见分光光度计的使用方法并了解此仪器的主要构造。主要构造。
二、实验原理
1紫外可见分光光度法，1紫外可见分光光度法，是以溶液中物质的分子或离子对紫外和紫外可见光谱区辐射能的选择性吸收为基础而建立起来的一类分析方法。可见光谱区辐射能的选择性吸收为基础而建立起来的一类分析方法。紫外光：10紫外光：10400
m可见光：400
m，（可被人们的眼睛所感觉），（可被人们的眼睛所感觉可见光：400780
m，（可被人们的眼睛所感觉）特点：光谱、特点：带光谱、分子光谱应用：定性分析最大吸收波长；应用：定性分析最大吸收波长；定量分析朗伯比尔定律（标准曲线法和标准加入法）定量分析朗伯比尔定律（标准曲线法和标准加入法）a定性分析原理：a定性分析原理：定性分析原理吸收曲线：吸收峰的数目、位置、相对强度以及吸收峰的形状吸收曲线：吸收峰的数目、位置、相对强度以及吸收峰的形状
b定量分析原理：b定量分析原理：定量分析原理根据朗伯－比耳定律：Aεbc，当入射光波长λ及光程b一定时，一定时，根据朗伯－比耳定律：εbc，A
f在一定浓度范围内，成正比。在一定浓度范围内，有色物质的吸光度A与该物质的浓度c成正比。定量分析常用的方法是标准曲线法即只要绘出以吸光度A为纵坐为横坐标的标准曲线，测出试液的吸光度，标，浓度c为横坐标的标准曲线，测出试液的吸光度，就可以由标准曲线查得对应的浓度值，即未知样的含量。线查得对应的浓度值，即未知样的含量。c仪器组成部件c仪器组成部件仪器组成部件各种类型的紫外可见分光光度计，如下图所示，各种类型的紫外可见分光光度计，如下图所示，从总体上来说是由五个部分组成，即光源、单色器、吸收池、由五个部分组成，即光源、单色器、吸收池、检测器和信号显示记录装置。
2本实验采用紫外分光光度法测定蛋白质含量的实验原理：2本实验采用紫外分光光度法测定蛋白质含量的实验原理：本实验采用紫外分光光度法测定蛋白质含量的实验原理（1）蛋白质中酪氨酸和色氨酸残基的苯环含有共轭r