50溶血试验CH50测定补体实验
溶血CH补体补体实验标题50溶血试验CH50测定补体实验摘要50溶血试验即求得能使50致敏羊红细胞发生溶血的最小量血清，然后计算出每毫升血清中补体含量。以补体量作为横坐标，溶血百分数作为纵坐标，可得到一个清晰的“S”形曲线。在50溶血周围，线段近似一条直线。因此当补体用量稍有变动，就可对溶血程度发生很大影响。所以用50溶血作……关键词溶血CH补体补体实验
50溶血试验即求得能使50致敏羊红细胞发生溶血的最小量血清，然后计算出每毫升血清中补体含量。以补体量作为横坐标，溶血百分数作为纵坐标，可得到一个清晰的“S”形曲线。在50溶血周围，线段近似一条直线。因此当补体用量稍有变动，就可对溶血程度发生很大影响。所以用50溶血作为终点要比100溶血更为敏感。50溶血试验定血清中补体含量用以下公式表示：
该公式可以从Vo
Krogh方程式进一步加以论证：
假定X加入的新鲜血清量y溶血的百分率，以小数表示V斜率
fk常数
转变成对数，上述公式就变成
材料及器材1．稀释液（磷酸盐缓冲生理盐水）NaCl17gNa2HPO411gKH2PO4027g蒸馏水100ml使用时取此原液50ml，加90ml蒸馏水。经高压灭菌后即可使用。加入100硫酸镁溶液1ml，可增强补体的效能。2．绵羊红细胞悬液（1×10gml）3．溶血素（2U）2．被检血清（新鲜豚鼠血清）3．水平离心机4．水浴箱5．721型分光光度计
f方法：1．浓度为1×10gml的绵羊红细胞配制取经稀释洗涤后的绵羊红细胞配成较5稍浓的细胞悬液。取50细胞悬液1ml，加于14ml蒸馏水中测OD值为Di按下式求出于一定体积的5细胞悬液中应加入稀释液的毫升数。
2．致敏绵羊细胞取绵羊红细胞悬液（1×102／ml）加等量的溶血素（2U／ｍｌ）。充分混合。置37℃水浴中作用30分钟，每隔10分钟摇动一次以免细胞下降即成5×108／ml致敏羊红细胞。3．补体CH50单位测定⑴按下表加样：
⑵将各管充分混合。置37℃水浴中60分钟（摇动1～2次，以免红细胞下沉。）⑶从水浴中取出后，立即将各管以2000转／分离心10分钟，将各管上清液分别移于另一试管。⑷测定各管上清液ＯＤ值（波长＝540ｎｍ）
f4．补体ＣＨ50单位的计算从测定管（第1～5管）及溶血对照管（第６管）的ＯＤ值中减去红细胞对照管（第7管的ＯＤ值。再减去按待测血清每管实际用量计算出的血清色度ＯＤ值（80／800该管实际量第8管ＯＤ值）。即为测定管的校正ＯＤ值。然后计算各测定管的溶血率（ｙ值）
再计算各管的ｙ／（１－ｙ）值。在双对r