糖含量。其原理为多糖在浓硫酸的作用下水解成单糖分子,并迅速脱水生成糖醛衍生物,然后和苯酚生成橙黄色化合物,在波长480490
m处和一定浓度范围内,其吸光度与糖浓度呈线性关系。但苯酚硫酸法存在平行测定波动性大,重复性差,不同的含糖物质测定条件不同等缺点。苯酚硫酸法测定香菇菌盖多糖为原料,研究其显色条件,并对该方法的精密度回收率稳定性进行考察,得出香菇菌盖多糖含量的最佳测定方法。为应用苯酚硫酸法精确测定香菇菌盖多糖的含量提供了重要的实验依据,为香菇菌盖多糖的深入研究奠定了基础。
f二、设计(论文)主要内容
本课题采用苯酚硫酸法对香菇菌盖中多糖进行测定并对此方法进行深入研究,探索苯酚硫酸法测定香菇菌盖多糖的最优条件。主要内容如下:(1)香菇菌盖多糖的提取(2)探讨不同的苯酚用量、硫酸用量、反应时间、温度、吸收波长等对实验的影响,找出最佳工艺条件。(3)利用紫外分光光度计对产品进行定性定量检测通过实验确定苯酚硫酸法测定香菇菌盖多糖的最优条件,包括苯酚和硫酸的用量、温度、反应时间等。找出最佳工艺条件,对产品进行定性定量检测。
三、设计(研究)方案1、试剂及仪器:苯酚、硫酸、葡萄糖、乙醇均为国产分析纯试剂,紫外分光光度计,超声波清洗仪,鼓风干燥箱,搅拌机,水浴锅,电子天平,烧杯,量筒及具塞试管。2、实验流程:(1)香菇菌盖多糖的提取:取100g香菇,用搅拌机磨碎成干粉状态,加1L蒸馏水浸润1h,用超声波清洗仪处理后按液固比为151加蒸馏水,于100℃提取8h,提取2次,过滤合并滤液,在滤液中加入95乙醇,静置过夜得沉淀,将沉淀加适量的蒸馏水使之溶解,减压浓缩后,即为香菇菌盖多糖样品液。(2吸收波长的选择:量取1ml的样品液和葡萄糖标准溶液,以蒸馏水为空白,在分光光度计上扫描波长在400600
m之间的吸收度,检测最大吸收波长。(3)硫酸用量的选择:量取1ml样品液于具塞玻璃试管中加蒸馏水补足至2ml,加5苯酚溶液1ml摇匀后分别迅速滴加不同量的浓硫酸,室温放置30mi
,于(2)测定的波长测吸光度。(4)苯酚用量的选择:量取1ml样品液于具塞玻璃试管中加蒸馏水补足至2ml,分别滴加不同量的苯酚,摇匀后迅速滴加(3)确定的浓硫酸,室温放置30mi
,于(2)测定的波长测吸光度。(5)显色温度的选择:量取1ml样品液于具塞玻璃试管中加蒸馏水补足至2ml,加入由(3)和(4)确定的硫酸和苯酚,摇匀后分别在不同的温度下放置30mi
,于(2)测定的波长测吸r