全球旧事资料 分类
实验名称
TitleofExperimet
实验日期
氨基酸薄层层析
实验地点
DateofExperime
t
合作者
LabNo指导老师
Part
er
I
structor
总分
TotalScore
XX
教师签名
Sig
ature
李某某
批改日期
Date
【实验报告第一部分(预习报告内容):①实验原理、②实验材料(包括实验样品、主
要试剂、主要仪器与器材)、③实验步骤(包括实验流程、操作步骤和注意事项);评分
XX(满分30分):】
一、预习报告
实验原理:
层析(chromatography):利用混合物各组分物理化学性质的差异,将多组分混合物进行分离及测定的方法。固定相(statio
aryphase)层析体质的一个基质。能与待分离的化合物进行可逆的
吸附、溶解、交换等作用。流动相(mobilephase)在层析过程中推动固定相上贷分离的物质朝着一个方
向运动的液体或气体。迁移率(rateofflow,Rf)一定条件下,在特定时间内某一组份在固定相移动的距
离与流动相本身移动的距离之比值,Rf值≤1。层析原理:层析体系由一个固定相和一个流动相组成。流动相对固定相做相对运动,从而推动待分离的混合物样品通过固定相向前移动。样品中各组份物理化学性质不同,与两相发生相互作用的能力不同,被流动相推动前进时受到的阻力和移动速度不
f同,一定时间后,不同组份就可以在固定相上分离。根据固定相基质的形式,层析可分为纸层析、薄层层析和柱层析。薄层层析是在玻
璃或塑料等光滑表面铺一层很薄的基质进行层析。薄层层析(thi
layerchromatography,TLC):是将吸附剂均匀地在玻璃板上铺
成薄层(固定相),再把样品点在薄层板一端,再把板的这端浸入适当的溶剂(流动相)在薄层板上扩展。并在此过程中通过吸附解吸附再吸附再解吸附的反复进行,而将样品各组份分离出来。
本次实验:
具体原理:当流动相在固定相上流动时,由于吸附剂对不同氨基酸的吸附力不一样,不同氨基酸在展开溶剂中的溶解度不一样,点在薄板上的混合氨基酸样品随着展开剂的移动速率也不同,因而可以彼此分开。
吸附剂(固定相):硅胶(CP)。为使制成的薄层板不易松散,加入5羟甲基纤维素钠(CMCNa)作黏合剂。
展开剂:正丁醇、冰醋酸和蒸馏水的混合液(801010VVV)。展层显色剂:按照101比例(VV)混匀的展开剂和01茚三酮溶液。活化(activatio
):在一定温度下,对吸附剂硅胶加热去除水分。可使硅胶的
活性提高,吸附能力加强。氨基酸与茚三酮的显色反应:茚三酮水化后生成的水合茚三酮在加热时被还原,
此产物与氨基酸加热分解产生的氨结合,r
好听全球资料 返回顶部