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尚择优选
实验名称
TitleofERperimet

氨基酸薄层层析
实验日期
实验地点
DateofERperime
t
LabNo
合作者
指导老师
Part
er
I
structor
总分
RR
教师签名李某某批改日期
TotalScore
Sig
ature
Date
【实验报告第一部分(预习报告内容):①实验原理、②实验材料(包括实验样品、主
要试剂、主要仪器与器材)、③实验步骤(包括实验流程、操作步骤和注意事项);评分
RR(满分30分):】
一、预习报告
实验原理:
层析(chromatographR):利用混合物各组分物理化学性质的差异,将多组分混合物进行分离及测定的方法。固定相(statio
arRphase)层析体质的一个基质。能与待分离的化合物进行可逆的
吸附、溶解、交换等作用。
流动相(mobilephase)
在层析过程中推动固定相上贷分离的物质朝着一个方向运动的液体或气体。
迁移率(rateofflow,Rf)一定条件下,在特定时间内某一组份在固定相移动的距离与流动相本身移动的距离之比值,Rf值≤1。
层析原理:层析体系由一个固定相和一个流动相组成。流动相对固定相做相对运动,从而推动待分离的混合物样品通过固定相向前移动。样品中各组份物理化学性质不同,与两相发生相互作用的能力不同,被流动相推动前进时受到的阻力和移动速度不同,一定时间后,不同组份就可以在固定相上分离。根据固定相基质的形式,层析可分为纸层析、薄层层析和柱层析。薄层层析是在玻璃或塑料等光滑表面铺一层很薄的基质进行层析。
薄层层析(thi
laRerchromatographR,TLC):是将吸附剂均匀地在玻璃板上铺成薄层(固定相),再把样品点在薄层板一端,再把板的这端浸入适当的溶剂(流动相)在薄层板上扩展。并在此过程中通过吸附解吸附再吸附再解吸附的反复进
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行,而将样品各组份分离出来。
本次实验:
具体原理:当流动相在固定相上流动时,由于吸附剂对不同氨基酸的吸附力不一样,不同氨基酸在展开溶剂中的溶解度不一样,点在薄板上的混合氨基酸样
品随着展开剂的移动速率也不同,因而可以彼此分开。吸附剂(固定相):硅胶(CP)。为使制成的薄层板不易松散,加入5羟甲基
纤维素钠(CMCNa)作黏合剂。
展开剂:正丁醇、冰醋酸和蒸馏水的混合液(801010VVV)。展层显色剂:按照101比例(VV)混匀的展开剂和01茚三酮溶液。活化(activatio
):在一定温度下,对吸附剂硅胶加热去除水分。可使硅胶的
活性提高,吸附能力加强。
氨基酸与茚三酮的显色反应:茚三酮水化后生成的水合茚三酮在加热时被还原,r
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