。分装有扩增反应液的反应管应当扣盖或装入密实袋内再转移至样本处理区。
(三)加样加样应当在样本处理区进行。加样时应当使样品完全落入反应液中,不应有样品粘附于管壁上,加样后应尽快盖紧管盖。按试剂、仪器说明书完成加样和反应管准备。(四)扩增检测扩增检测在扩增区进行。待检管转移至扩增区,按顺序置于仪上,编辑样本信息,按试剂和仪器说明书设定循环参数。(五)结果分析根据所用试剂盒说明书设置基线值()。荧光阈值()设定以阈值线刚好超过阴性对照品扩增曲线(无规则的噪音线)的最高点为原则,且值应大于所设置的扩增循环数(或显示为)。使用仪器配套软件自动分析结果。(六)质量控制检测过程对可能出现的假阳性和假阴性进行质量控制,
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f除了检测商品试剂盒所提供阳性和阴性对照外,每次临床样本检测时,至少应当有份弱阳性和份阴性质控样本(多份阴性质控样本设置对实验室“污染”所致假阳性的监控更为有效),随机放在所检测标本的中间。弱阳性质控样本可为检测阳性的灭活稀释后保存的临床样本、灭活病毒或假病毒颗粒等,如所采用的商品化试剂盒有“内标”控制假阴性,或弱阳性质控样本来源困难,可暂不设弱阳性质控。阴性质控样本采用标本采集管内溶液即可。质控样本应与临床标本同等对待,参与样本核酸提取和扩增检测全过程。
试剂盒中的阳性和阴性对照用于判断实验室的有效性,按试剂盒说明书进行。
(七)实验结果的判定与解释。按照试剂盒说明书进行。对于出现弱阳性结果的样本应进行重复检测,并注意与可能的实验室轻度或样本交叉“污染”所致假阳性结果区别。五、检测结果报告按照试剂盒说明书进行。六、其它注意事项(一)人感染禽流感病毒实验室活动、样本采集和运输按照《人间传染的病原微生物名录》中高致病性禽流感病毒进行管理。从事人感染禽流感检测的技术人员必须经过生物安全培训并具备相应的实验技能,在检测过程中必须采取生物安全防护措施(使用眼罩、型口罩等)。样本核酸提取必
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f须在Ⅱ级生物安全实验室,经过年检合格的二级生物安全柜内进行。实验室应具有良好的通风。
(二)注意仪器设备的日常和定期维护,加样器、扩增仪和温育设备应进行定期校准。试剂盒及一次性使用的无酶和酶反应管、离心管、带滤芯吸头等应进行每批质检。
(三)实验应严格分区操作;各区物品、工作服等均应当专区专用,不得交叉使用。实验后应及时清洁工作台,以防污染。
(四)每批实验室r