热链球菌、保加利亚乳杆菌等双菌或多菌联用。因此,双歧杆菌常规检测技术的主要目的就是将之与其混合培养的其它菌种分离开来。211双歧杆菌的选择性培养基检测
f双歧杆菌选择性计数的原理是在培养基中添加抑制其它菌群的抗生素,或采用棉子糖、低聚糖等其它菌群无法利用的糖类,从而达到选择性检出双歧杆菌的目的。添加的抗生素主要包括:新霉素、巴龙霉素、萘啶酮酸、氯化锂等。由于双歧杆菌内种不同,到现在还没有一种通用的双歧杆菌培养基可用于全部双歧杆菌的选择性检测。值得注意的是,有许多双歧因子,如西红柿汁、肝浸汁、乳糖糖浆、人乳清26果糖低聚糖等3,均可促进双歧杆菌的生长。可在双歧杆菌培养基中添加这些物质以促进双歧杆菌的生长。加富布氏培养基(AMC)和添这些物质以促进双歧杆菌的生长。加富布氏培养基(AMC)和添加半胱氨酸的MRS培养基被认为是工业品控实验室的较佳选择4。
212双歧杆菌ELISA检测技术ELISA(酶联免疫吸附实验)是一种高效的免疫学检测方法。测定时,受检标本(测
定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。洗涤,使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体,使之反应并结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入可与酶反应的底物后,底物被催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。反应中酶的催化效率很高,间接地放大了免疫反应的结果,使得测定方法达到很高的敏感度。近年来许多学者报道了使用此方法检测样品中的双歧杆菌。213双歧杆菌酶学检测技术
双歧杆菌属中大多数细菌细胞的抽提物中具有F6PPK。一般认为检测出F6PPK可作为鉴定双歧杆菌属细菌的重要特征之一。。EVlkova5等对F6PPK、α半乳糖苷酶、α葡糖苷酶的活性进行检测,并将检测结果与经典培养计数法、荧光原位杂交法的结果进行比较,并无明显差异。所有的阳性样品均表现较高的α半乳糖苷酶和β葡糖苷酶活性,而阴性样品缺乏此两种酶一种或两种的活性。且所有的阴性样品均不表现F6PPK活性。此外,许多相关研究中也经常采用检测F6PPK酶活的方法来作为参照6。22双歧杆菌分子生物学检测和鉴定技术进展
传统的细菌生化反应并不能有效地对各种生境分离出来的菌株进行分类和鉴定,所以只有采取多种手段并用,即采用基因型和表型特征相结合的办法才能够对不同的双歧杆菌菌株进行分类r