波长的单色光为基础。其测量原理如图21所示。分光光度法的原理是：单色器将光源发出的复色光分成单色光，特定波长的单色光通过盛有样品溶液的比色池，样品的吸光度与样品溶液浓度和光通过的距离即光径成正比。光电转换器将透射光转换为电信号，此后经信号处理系统处理，可得到样品溶液的浓度。当光通过盛有样品溶液的比色杯时，吸收的强度与溶质浓度和光通过的距离有一定的关系。
光源
前置光学系统
单色器
比色杯
光电探测器
图21分光光度法的原理图
布格Bouguer和朗伯Lambert在1729年和1760年阐明了光辐射强度和吸
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f江苏大学硕士学位毕业论文收层厚度的关系，1852年比尔Beer又提出光辐射强度和吸收物浓度也具有类似的关系，布格朗伯比尔定律的数学表达式为14：
AlgI01lgbcI1T
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其中A光通过介质被介质吸收的吸光度T透射光强与入射光强之比即透光率
I0入射光强度
I1透射光强度
ε介质摩尔吸光系数mlmol1cm1c吸收物的摩尔浓度mlmolb吸收层厚度cm上式表明，当特定波长的单色光通过溶液时，样品的吸光度与溶液中吸收物浓度和光通过的距离成正比。半自动生化分析仪就是通过检测样品对某种单色光的吸收程度，以及反应过程中吸光度的变化来计算样品中待测成份的含量。但上式是以下列条件为前提：1吸收过程中各物质无相互作用，但各物质的吸光度具有加合性；2辐射与物质的作用仅限于吸收过程，没有荧光、散射和光化学现象；3吸收物是一种均匀分布的连续体系。
222生化分析的步骤
生化测试是在生化样品中加入分析试剂进行反应，连续监测反应过程中吸光度的变化，通过分析吸光度变化情况进行生化分析，求取待测生化指标浓度。一个完整的数据分析过程要经过两个步骤：首先，监测生化反应过程的吸光度变化，获取生化反应曲线取得反应吸光度；第二步由反应吸光度求取生化指标的值15。
223生化分析的方法
在不同的生化反应中，反应吸光度的求取方法也不同。根据不同的反应曲线
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f江苏大学硕士学位毕业论文特点即形成复合物的速度特点，一般把测定的方法分为终点法、速率法、双波长法和两点法1618。1）终点法是使用一种或两种试剂，当样品和试剂混合后，待测样品与试剂的物理化学反应到达终点时，测一次吸光度，来计算待测样品的浓度。在利用终点法进行定量分析时分别需要对空白、标准和待测样品三个试样进行测量，得到三个吸光度值，分别为r