小鼠白介素6IL6酶联免疫分析
试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供研究使用。
检测范围：08
gL
96T
使用目的：
本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中白介素6IL6含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠白介素6IL6水平。用纯化的小鼠白介素
6IL6抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入白介素6IL6，再
与HRP标记的白介素6IL6抗体结合，形成抗体抗原酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后
加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄
色。颜色的深浅和样品中的白介素6IL6呈正相关。用酶标仪在450
m波长下测定吸光度
（OD值），通过标准曲线计算样品中小鼠白介素6IL6浓度。
试剂盒组成
130倍浓缩洗涤液
20ml×1瓶
7终止液
6ml×1瓶
2酶标试剂
6ml×1瓶
8标准品（16
gL）05ml×1瓶
3酶标包被板
12孔×8条
9标准品稀释液
15ml×1瓶
4样品稀释液
6ml×1瓶
10说明书
1份
5显色剂A液
6ml×1瓶
11封板膜
2张
6显色剂B液
6ml×1瓶
12密封袋
1个
标本要求
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能
马上进行试验，可将标本放于20℃保存，但应避免反复冻融
2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤
1标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀
释。
8
gL
5号标准品
150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
4
gL
4号标准品
150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
2
gL
3号标准品
150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
1
gL
2号标准品
150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
05
gL
1号标准品
150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液
2加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，
f然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。3温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4配液：将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用5洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。6加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。7温育：操作同3。8洗涤：操作同5。9显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色r