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高灵敏小鼠白细胞介素6(IL6)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书
金益柏试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定小鼠血清,血浆样本中白细胞介素6(IL6)含量。实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠白细胞介素6(IL6)水平。用纯化的小鼠白细胞介素6(IL6)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入白细胞介素6(IL6),再与HRP标记的白细胞介素6(IL6)抗体结合,形成抗体抗原酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的白细胞介素6(IL6)呈正相关。用酶标仪在450
m波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中小鼠白细胞介素6(IL6)浓度。试剂盒组成:试剂盒组成说明书封板膜密封袋酶标包被板标准品:135pgmL标准品稀释液酶标试剂样品稀释液显色剂A液显色剂B液终止液浓缩洗涤液48孔配置1份2片(48)1个1×4805ml×1瓶15ml×1瓶3ml×1瓶3ml×1瓶3ml×1瓶3ml×1瓶3ml×1瓶(20ml×20倍)×1瓶96孔配置1份2片(96)1个1×9605ml×1瓶15ml×1瓶6ml×1瓶6ml×1瓶6ml×1瓶6ml×1瓶6ml×1瓶(20ml×30倍)×1瓶28℃保存28℃保存28℃保存28℃保存28℃保存28℃保存28℃保存28℃保存28℃保存保存
样本处理及要求:1血清:室温血液自然凝固1020分钟,离心20分钟左右(20003000转分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
f2血浆:应根据标本的要求选择EDTA、者柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合1020分钟后,离心20分钟左右(20003000转分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。3尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(20003000转分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。4细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(20003000转分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7274)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(20003000转分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。5组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH74。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持28℃的温度。加入一定量的PBS(PH74),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(20003000转分)。仔细收集上清。r
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