明刻度（以厘米为单位），参见下图。
f图2实验装置示意图
（4）点样：用毛细管分别取10mL左右的氨基酸样品点在四个位置上。干后重复点样，同一位置上需点2～3次，2～3mL次，保证每点在纸上扩散的直径最大不超过3mm。其中3个是已知样，1个是待测样品。（5）层析：用针、线将滤纸缝成筒状，纸的两侧边缘不能接触且要保持平行，参见图11。向培养皿中加入扩展剂，使其液面高度达到1cm左右，将点好样的滤纸筒直立于培养皿中（点样的一端在下，扩展剂的液面在A线下约1cm），罩上大烧杯，仍用塑料薄膜密封。当扩展剂上升到A线时开始计时，每隔一定时间测定一下扩展剂上升的高度，填入表1中。当上升到15～18cm，取出滤纸，剪断连线，立即用铅笔描出溶剂前沿线，自然风干或用电吹风热风吹干。（6）显色：用喷雾器在通风厨中向滤纸上均匀喷上01茚三酮正丁醇溶液，然后置烘箱中烘烤5分钟100℃或用热风吹干即可显出各层析斑点。（7）计算各种氨基酸的Rf值，并判断混合样品中都有哪些氨基酸，各人将自己的实验结果贴在实验报告上，见表2。（8）以层析时间为横坐标，扩展剂上升高度为纵坐标画图，求出扩展剂上升到15cm时所需要的时间。
f【实验结果与数据处理】
表1扩展剂前沿上升速度X（mi
）0510152030406090…Y（cm）00815215375485597988815
原点到层析斑点中心的距离原点到溶剂前沿的距离Rf判断待测氨基酸
表2各种氨基酸的Rf值
赖氨酸脯氨酸
亮氨酸
011
043
070
088
088
088
012
048
079
赖氨酸、脯氨酸、亮氨酸
待测氨基酸044088050
【实验结论】通过实验可以知道每种氨基酸的在扩展剂中的移动速率是不相同的，利用每种氨基酸
在纸上的位置不同可以计算出氨基酸的Rf值。和标准的Rf值对比，得出氨基酸种类。据此由上表2可知，混合氨基酸是由赖氨酸、脯氨酸、亮氨酸组成。
【注意事项】⑴点样时要避免手指或唾液等污染滤纸有效面即展层时样品可能达到的部分。⑵点样斑点不能太大，防止层析后氨基酸斑点过度扩散和重叠，且点样后吹风温度不
宜过高，以免样品变性斑点发黄。⑶展层开始时切勿使样品点浸入溶剂中。⑷展层剂要临用前配制，以免发生酯化，影响层析结果。⑸如果样品中溶质种类较多，且某些溶质在某一溶剂系统中的Rf值十分接近时，单
向层析分离效果不佳，则可采用双向层析，即将样品点在一方形滤纸的角上，先用一种溶剂系统展层。滤纸取出干燥后，再将滤纸转90度角，用另一溶剂系统展层。所得图谱分r