高效液相色谱法测定维生素C的含量
【摘要】高效液相色谱法已经成为解决生命科学、医药学发展中各种难题的重要手段，在实验
室中也广泛应用于物质的定性定量分析。本实验中利用高效液相色谱法对维生素C进行定量分析，所采用的定量分析方法为外标法，通过做出标准溶液浓度与峰面积的标准曲线进而对样品中的维生素C进行定量检测。
【关键词】高效液相色谱法、维生素C、含量
1、引言
维生素C（Vitami
CVc）又叫抗坏血酸，是一种水溶性维生素。Vc在体内参与多种反应，如氧化还原过程，在生物氧化和还原作用以及细胞呼吸中起重要作用。人体内缺乏Vc时容易导致坏血病。同时，由于Vc是一种水溶性的强有力抗氧化剂并参与胶原蛋白的合成，它同时还具有防癌、预防动脉硬化、治疗贫血、抗氧化和提高人体免疫力等功效。Vc在蔬果中普遍存在，尤其是柑桔类水果中含量较高。樱桃、番石榴、辣椒、猕猴桃等水果中Vc含量在50300mg100g。
溶于流动相（mobilephase）中的各组分经过固定相时，由于与固定相（statio
aryphase）发生作用（吸附、分配、离子吸引、排阻、亲和）的大小、强弱不同，在固定相中滞留时间不同，从而先后从固定相中流出。高效液相色谱法（Highperforma
ceLiquidChromatography，HPLC）是在经典液相色谱法的基础上，于60年代后期引入了气相色谱理论而迅速发展起来的。它与经典液相色谱法的区别是填料颗粒小而均匀，小颗粒具有高柱效，但会引起高阻力，需用高压输送流动相，故又称高压液相色谱法（HighPressureLiquidChromatography，HPLC）。HPLC系统一般由输液泵、进样器、色谱柱、检测器、数据记录及处理装置等组成。其中输液泵、色谱柱、检测器是关键部件。有的仪器还有梯度洗脱装置、在线脱气机、自动进样器、预柱或保护柱、柱温控制器等，现代HPLC仪还有微机控制系统，进行自动化仪器控制和数据处理。制备型HPLC仪还备有自动馏分收集装置。
f2、HPLC测定维生素C的含量21、仪器试剂
211、仪器
高效液相色谱仪（Agile
t1260），色谱柱：C18柱250mm×46mmID5μm；平头进样器。
212、试剂
乙腈（色谱纯），冰乙酸，维生素C，磷酸二氢钾等均为分析纯，实验用水为超纯水。
Vc标准溶液：快速准确称取0025gVc，用1molL乙酸溶液溶解，定量转移至250mL容量瓶中，用1molL乙酸溶液定容，得到100mgL标准溶液备用，现用现配。
213、色谱条件
流动相：3的乙腈005molL测波长265
m；进样量10μL。
水溶液（vv）；流速1mLmi
；柱温30℃，紫外检
22、实验步骤221、样品处理
1、按操作说明开启液r