ABO血型鉴定的方法步骤与注意事项
一原理根据红细胞上有或无A抗原或B抗原,将血型分为A型、B型、
AB型及O型4种。可利用红细胞凝集试验,通过正、反定型准确鉴定ABO血型。所谓正定型,是用已知抗A和抗B分型血清来测定红细胞上有无相应的A抗原或B抗原;所谓反定型,是用已知A细胞和B细胞来测定血清中有无相应的抗A或抗B。二试剂和材料
1.抗AB型血、抗BA型血及抗A十BO型血分型血清(制备方法见本节附注)
2.5%A、B及O型试剂红细胞盐水悬液,制备方法见本节附注;3.受检者血清;4.受检者5%红细胞盐水悬液,制备方法见本节附注。三方法1.试管法1取洁净小试管3支,分别标明抗A、抗B和抗A十B,用滴管分别加抗A、抗B和抗A十B。分型血清各l滴于试管底部,再以滴管分别加入受检者5%红细胞盐水悬液1滴,混和。2另取洁净小试管3支,分别标明A、B和O细胞。用滴管分别加入受检者血清l滴于试管底部,再分别以滴管加入A、B和O型5%试剂红细胞悬液l滴,混和。3立即以1000r/mi
离心1mi
。
f4将试管轻轻摇动,使沉于管底的红细胞浮起,先以内眼观察有
无凝集或溶血现象。如内眼不见凝集,应将反应物倒于玻片上,再
以低倍镜检查。
5观察结果时既要看有无凝集,更要注意凝集强度,此有助于A、
B亚型、类B或cisAB的发现。
6凝集强度判断标准
凝集强度
判断标准
4
红细胞凝集成一大块,血清清晰透明。
3
红细胞凝集成数小块,血清尚清晰。
2
红细胞凝块分散成许多小块,见到游离红细胞。
1
肉眼可见大颗粒,周围有较多游离红细胞
镜下可见数个红细胞凝集在一起,周围有很多游离红细胞
混合凝集外观mixedfield是指镜下可见少数红细胞凝
MF集,而极大多数红细胞仍呈分散分布。
表示阴性,镜下未见凝集,红细胞均匀分布。
2玻片法(1)取清洁玻片1张或白瓷板1块,用蜡笔划成方格,标明抗
A、抗B和抗A十B,分别用滴管滴加抗A、抗B和抗A十B分型血清l滴于标明的方格内,再各加受检者2%红细胞悬液1滴,混和。
2另取洁净玻片一张或白瓷板1块,用蜡笔划成方格,标明A细胞、B细胞和O细胞,用滴管各加受检者血清1滴,再分别用滴管
f滴加A、B和O型试剂红细胞悬液1滴。3将玻片或白瓷板不断轻轻转动,使血清与细胞充分混匀,连
续约15mi
,以肉眼观察有无凝集或溶血反应。如以玻片作试验时,也可用低倍镜观察结果。四结果判定
ABO血型正反定型结果
分型血清受检r