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用于固定蛋白质并实现蛋白质的直接电子转移,例如葡萄糖氧化酶、胆红素氧化酶和细胞色素c19。Ya
g和他的同事20用戊二醛将辣根过氧化物酶和多壁碳纳米管与壳聚糖的复合膜交联到一起,再将辣根过氧化物酶固定到玻碳电极表面。Cai和Che
等21将CNTs分散到表面活性剂中再混合血红蛋白,然后用Nafio
将它们固定到电极表面。本文通过十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)用CNTs把血红蛋白(Hb)固定到玻碳电极(GCE)表面。CTAB提供一种快速有效地分散溶解单壁碳纳米管(SWCNTs)的方法,并且更容易将Hb固定到SWCNTs表面。CTAB的生物相容性将提供一种更好的微环境来保持蛋白的活性,我们希望通过SWCNTsCTAB纳米复合膜来提高Hb在电极表面的直接电子转移能力。实验表明,复合膜中的Hb实现了直接电子转移,同时对H2O2的表现出良好的电催化活性,可用作检测H2O2的生物传感器。该制备方法简便、廉价、可避免蛋白的失活,所得生物传感器具有很好的稳定性和重现性。2实验部分21试剂血红蛋白(Hb)购于上海生工;十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)购自国药集团化学试剂有限公司;单壁碳纳米管(si
glewalledcarbo
a
otubes,SWCNTs,纯度超过95)购自深圳纳米港;过氧化氢(30wt)购于汕头西陇化学试剂有限公司。01molL不同pH值的磷酸盐(PBS)缓冲溶液是通过混合Na2HPO4和NaH2PO4的标准溶液,并加入KCl作支持电解质配制而得;其他所有化学试剂均为分析纯试剂并未进行进一步处理;所有的溶液均用二次蒸馏水配制。22仪器设备及测试方法
2
f紫外可见吸收光谱由GBCCi
tra10e紫外可见光谱仪测定;HH4数显恒温水浴锅(购自国华电器有限公司);KQ50B型超声波仪器清洗器;PHS3B精密pH计;电化学实验在CHI650C电化学工作站(CHI
strume
t,USA)上进行。电化学池采用传统的三电极系统:修饰或未修饰的玻碳电极(3mm直径)作为工作电极,铂丝电极和AgAgCl(30molLKCl)电极分别作为辅助电极和参比电极。所有实验都在室温(20±2C)下进行。循环伏安实验在静止的体系中进行,电流-时间响应实验在搅拌体系中进行。电化学实验前所有溶液通氮气至少20分钟,实验过程中电化学体系一直处于氮气氛围中保护,以消除溶液中溶解氧的影响。23HbSWCNTsCTABGCE的制备GCE(3mm直径)依次用10,03和005m的Al2O3粉末打磨抛光,并在乙醇和蒸馏水中交替超声清洗三次,在铁氰化钾检测液中检验电极可逆性,氮气吹干待用。然后将50mgCTAB加入到5mL蒸馏水中,超声溶解;再向其中加入25mgHb超声溶解;最后向混合溶液r
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