2）通过PEG诱导鸡血细胞之间的融合实验，初步掌握细胞融合的基本方法。（3）
二、实验原理
细胞融合又称体外细胞杂交，是指用人工方法使两个或两个以上的体细胞融合成异核体细胞，随后，异核体细胞同步进入有丝分裂，核膜崩溃，来自两个亲本细胞的基因组和在一起形成只含有一个细胞核的杂种细胞。细胞融合技术是研究细胞遗传、基因定位、细胞免疫、病毒和肿瘤的重要手段。依据融合过程采用的助融剂的不同，细胞融合可分为：1病毒诱导的细胞融合，如仙台病毒；2化学因子诱导的细胞融合，如PEG；3电场诱导的细胞融合；4激光诱导的细胞融合。
PEG是乙二醇的多聚合物，存在一系列不同分子质量的多聚体。PEG可改变各类细胞的膜结构，使两细胞接触点处脂类分子发生疏散和重组，引起细胞融合。该方法应用相对分子质量为4006000的PEG溶液引起细胞的聚集和粘连，产生高频率的细胞融合。融合的频率和活力与所用PEG的分子质量、浓度、作用时间、细胞的生理状态与密度等有关。
三、实验仪器、材料和试剂
（1）仪器、用具：注射器、离心管、离心机、水浴锅、滴管、显微镜烧杯、容量瓶、
载玻片、盖玻片、酒精灯等。
（2）材料：鸡血细胞。
（3）试剂：
1）085NaCl溶液
2）GKN液：80gNaCl04gKCl177gNa2HPO42H2O069gNaH2PO4H2O20g
葡萄糖，001g酚红，溶于1L蒸馏水中。
3）50（mv）PEG溶液：取50gPEG4000水浴融化后冷却至5060℃加50m预热至
5060℃的GKN液，混匀，至于37℃备用。
4）Ha
ks原液（10×）：
800gNaCl12gNa2HPO42H2O40gKCl06gKH2PO420gMgSO47H2O
100g葡糖糖，14gCaCl2
○1称取14gCaCl2，溶于3050mL蒸馏水中。
○2取1L的烧杯及容量瓶各一个，先在烧杯中放入800mL蒸馏水，然后按上述
配方顺序，逐一称取药品。必须在前一药品完全溶解之后，方可加入下一药品，
直到葡糖糖完全溶解后，再将已溶解的CaCl2溶液加入，最后加水至1L。
5）Ha
ks液：
Ha
ks原液
100mL
3
f蒸馏水
896mL
05酚红
4mL
配好的ha
ks液保存于4度冰箱。
四、方法与步骤
1制作鸡血细胞储备液取来鸡血后，按照100U肝素5mL全血的比例制成抗凝全血，然后再在其中加入4倍体积的085NaCl溶液，制成红细胞储液，置于4℃冰箱内可供一周使用。2细胞悬液的制备取鸡血细胞储备液1mL，加入4mL085NaCl溶液，混匀后，1200rmi
离心5mi
，弃去上清液，再加入5mL085NaCl溶液按上述条件离心一次。最后，弃去上清液，加入3mL的GKN溶液制成鸡血细胞悬液。3鸡血细胞的收集吸取1mL鸡r