1、总黄酮含量硝酸铝~亚硝酸钠比色法,以芦丁计总黄酮含量硝酸铝~亚硝酸钠比色法,以芦丁计芦丁标准标准溶液的配制:准确称取经105℃干燥至恒重的芦丁标准品150mg精确至00001g)用甲醇溶解并定容至100mL,(,配成150gmL的芦丁标准溶液,制备标准曲线。精密称取一定量的测定样品,用30的乙醇溶液溶解定容至100mL,取1mL的待测液,加入30乙醇溶液至5mL,加入5亚硝酸钠溶液03mL,混匀后放置5mi
,加入10硝酸铝溶液03mL,混匀后放置6mi
,加入10molL氢氧化钠溶液4mL,用30乙醇定容至10mL,静置10分钟,以零管为空白,摇匀后用1cm的比色杯,在510
m的波长处测定吸光度,并根据芦丁的标准曲线计算试样的总黄酮含量。2、酚酸含量(福林试剂还原比色法,以没食子酸计)酚酸含量(福林试剂还原比色法,以没食子酸计)没食子酸标准溶液的配制:称取经真空干燥至恒重的没食子酸对照品250mg,用30的乙醇溶液溶解并定容至100mL,配成0250mgmL的没食子酸标准溶液,制备标准曲线。精密称取一定量的测定样品,用30的乙醇溶液溶解、定容,并稀释至适宜浓度,记录总体积。取01mL样品,并用水稀释至50mL,各加入05mL未稀释的福林试剂,混匀后静置8mi
,加入15mL20Na2CO3水溶液,室温暗处静置2h,以零管为空白,用1cm的比色杯,在765
m的波长处测定吸光度,并根据没食子酸的标准曲线计算试样的总酚含量。
抗氧化方法
ABTSABTS法先配制140mmolL过硫酸钾(K2S2O8)溶液和7mmolLABTS储备液,然在后取176L140mmolL过硫酸钾溶液和10mL7mmolLABTS储备液混合,
f室温条件下避光储备1216h。测定之前加入乙醇将ABTS溶液稀释至吸光值为0700±002(734
m)下将39mL的ABTS溶液与01mL待测样溶液(所用测试样品均溶解在50的甲醇中)混合摇匀,在室温下反应6mi
,734
m波在长下测定吸光值,以50的甲醇为空白对照RePellegri
iProtegge
teetal1999。根据下列公式计算每种待测样品对ABTS自由基的清除率∶抑制率()A空白A样品A空白×100以待测样品浓度为横坐标,清除率值为纵坐标绘制待测样品清除ABTS自由基的曲线。根据曲线的线性回归方程,计算得到ABTS自由基清除率为50时的待测样品浓度,定义为半抑制浓度(IC50),所有实验重复三次。DPPH法准确称取DPPH试剂20mg,用无水乙醇溶解至500mL容量瓶中,摇匀得0101mmolL。取待测样溶液01mL(所用测试样品均溶解在50的甲醇中)和39mLDPPH溶液混合摇匀,在r