，泡酒精，使用前照紫外，然后用女士用指甲油（注意用无色较稀的）将osmo
ic公司的膜贴上，剪掉多余的边缘。再照紫外。②上层培养液：上层培养液采用无血清培养基，为维持渗透压，需加入00502BSA。③细胞：值得注意的是，有侵袭能力的细胞才可用于Tra
swell侵袭实验。建议实验前先用酶谱法检测MMPs的表达，特别是MMP2的表达。如果不清楚细胞MMPs的表达情况，就盲目进行Tra
swell侵袭实验，可能会造成不必要的浪费，一次Tra
swell侵袭实验花钱少则数百，多则数千，并不是笔小数目，还是小心为妙。另外，为了让实验结果更明显，可先撤血清让细胞饥饿12－24h，再进行实验。④基质胶：常用的是人工重构基底膜材料Matrigel，主要成分为层黏连蛋白和Ⅳ型胶原，生产厂家有BD、美国CollaborativeRsearch公司等。CaoY战友的帖这么说的：Matrigel是BD公司生产的，是一种细胞外基质，4度时是液体，在37度会逐渐凝固成胶状，不可逆。同样的东西在sigma叫ECM。zha
gyo
g1036战友提供的价格：BD公司的matrigel1500左右。如果购买的小室是已经铺好基质胶的，那么Matrigel就不需要购买了。⑤下层培养液：
精彩文档
f实用标准文案
下层常用含5－10FBS的培养基，具体浓度根据细胞侵袭力而定，侵袭力弱的细胞可适当提高FBS浓度。下层也可用趋化因子，有战友将纤维粘连蛋白加入下层培养液作为趋化因子，但个人认为，FBS仍是最合适的。⑥细胞培养板：常用于Tra
swell侵袭实验的细胞培养板有6孔板、12孔板、24孔板等，以24孔最常用。细胞培养板没什么特殊要求，普通的细胞培养板就可以。但要注意，细胞培养板应当与购买的Tra
swell小室相配套。⑦此外，膜的下室面可涂上纤维粘连蛋白fibro
ecti
，FN，Sigma有售，这样做的目的是使穿过膜的细胞更好地附着在膜上，也可用胶原（collage
）或明胶（gelati
）。很多战友认为这不是必须的，而且我也是不涂的，细胞照样贴壁很好。如果贴壁不好的话可以试试看。li
a
pi
g1979战友认为，如果培养时间很长（24h），细胞还是会掉到下室里面去，所以有条件的话，最好还是在膜下层涂上FN。另外，值得一提的是，膜下层涂上FN还有一定的趋化作用。2．步骤21Tra
swell小室制备211无基质胶Tra
swell小室制备①包被基底膜：用50mgLMatrigel18稀释液包被Tra
swell小室底部膜的上室面，4℃风干。如果需要在下室面铺FN的话，可将200ul枪头的尖端剪掉吸取FN均匀涂抹在小室的下面。用胶原（collage
）的话，一般配成05mgml，直接用枪吸了涂在膜上。②水化基r