甲苯等。蒸馏法适用于含水量较多,又有较多挥发性成分的样品。由于蒸馏时冷凝的水分呈小珠状粘附在冷凝管上,不能全都进入接收管中会造成读数误差;此外,由于甲苯或二甲苯能溶解少量水分,故甲苯或二甲苯应先以水饱和,弃水层后蒸馏,取蒸馏液使用。4)卡尔费休法原理:利用碘氧化二氧化硫时,需要定量的水参与反应的原理测定液体、固体和气体中的含水量。2H2OI2SO22HIH2SO4H2OSO2I23C5H5N→2C5H5NHIC5H5NSO3C5H5NSO3CH3OH→C5H5NHSO4CH3观察溶液颜色突变的目视法游离碘,棕红色;观察电流表偏转突变至一定值并稳定一段时间作为滴定终点。3掌握凯氏定氮法测定蛋白质的依据与原理、操作步骤以及方法说明;凯氏定氮的依据:蛋白质中的氮含量较恒定,只要能准确测定食物中的含氮量,就可以推算出蛋白质的含量。多数蛋白质的平均含氮量为16%,即每克氮相当于625克蛋白质。原理:样品与浓硫酸和催化剂一同加热消化使蛋白质分解,其中碳和氢被氧化为二氧化碳和水逸出,而样品中的有机氮转化为氨与硫酸结合成硫酸铵。然后加碱蒸馏,使氨蒸出。用硼酸吸收后再以标准盐酸或硫酸溶液滴定。根据标准酸消耗量可计算出蛋白质的含量。(滴定所用无机酸的量mol相当于被测样品中氨的量mol,根据所测得的氨量即可计算样品的含氮量,乘以蛋白质换算因子即可计算蛋白质含量。)操作步骤:消化、蒸馏与吸收、滴定
(2)蒸馏与吸收蒸馏:消化液40氢氧化钠加热蒸馏,放出氨气。吸收:4硼酸混合指示剂(红色)吸收蒸馏液(绿色)混合指示剂:亚甲蓝甲基红
(3)滴定盐酸标准液滴定吸收液,吸收液由绿色变为桃红色时为滴定终点。做两份平行样。方法说明:①所用试剂溶液应用无氨蒸馏水配制。②消化时不要用强火,应保持和缓沸腾,以免粘附在凯氏瓶内壁上的含氮化合物在无硫酸存在的情况下未
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f消化完全造成氮损失。
③样品中若含脂肪或糖较多时,消化过程中易产生大量泡沫,为防止泡沫溢出瓶外,在开始消化时应用小
火加热,并时时摇动。或者加入少量辛醇或液体石蜡或硅油消泡剂,并同时注意控制热源强度。
④消化时应不时转动凯氏烧瓶,以便利用冷凝酸液将附在瓶壁上的固体残渣洗下,并促进其消化完全。
⑤当样品消化液不易澄清透明时,可将凯氏烧瓶冷却,加入30%过氧化氢23mL后再继续加热消化。
⑥般消化至呈透明后,继续消化30分钟即可,但对于含有特别难以氨化的氮化合物的样品.如含赖氨
酸、组氨酸、色氨酸、酪氨酸或脯氨酸等时,需适当延长消化时间r