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实验书中的重点
1、高尔基复合体:家兔脊神经节切片,低倍:椭圆形或不规则淡黄色神经细胞。选集中区换用高倍。N细胞大小不等(原因细胞被切不在同一平面)泡状细胞核,周围为深褐色弯曲状、线状网状结构,即高尔基体。
2、中心体:马蛔虫子宫切片,低倍下找受精卵中期细胞,换高倍,蓝色条状为染色体。其两侧的蓝色小颗粒即中心粒。中心粒周围致密物质为中心球,二者即为中心体。周围可见星射线。中心体和星射线合称星体。有时因切片原因,中习题仅出现在一侧或两侧均观察不倒只有动物细胞受精卵才有中心体
3、细胞骨架观察:动物细胞:1细胞培养未致密时既可使用。PBS洗3次(或用灭菌牙签刮取人口腔上皮细胞于1ml生理盐水EP管中,3000r每分钟离心,弃上清液05ml后将下清液和细胞沉淀混匀涂片晾干,pbs洗三次)21Trito
X100作用破坏细胞膜,和胞内蛋白质,但能保持细胞骨架系统蛋白质完整(3)M缓冲液轻洗三次,每次两分钟,提高骨架稳定性。(4)略干3戊二醛固定细胞10mi
。(5)弃固定液,PBS洗三次,每次一分钟,滤纸吸干。(6)02考马斯亮蓝R250(作用染色)染色510mi
。蒸馏水冲洗,空中自然晾干。(7)光学显微镜下可见细胞中被染成蓝色的纤网状结构即细胞胞骨架。植物细胞:用洋葱鳞叶内皮细胞,缓冲液为磷酸盐缓冲液(PBSPH68),,另外在染色后用清水冲洗数遍,降低背景色。其余与动物细胞相同。
4、小白鼠腹腔巨噬细胞活动的观察:(1)巨噬细胞诱导:实验前三天,小鼠腹腔每天注射6淀粉肉汤1ml(含04台盼蓝,作用为诱导)刺激小鼠腹腔产生巨噬细胞。(2)鸡红细胞悬浮注射:每组取上述出理小鼠一只,腹腔注射1鸡红细胞悬液051ml,揉小鼠腹部,使红细胞扩散。(3)处死:三十分钟后,颈椎脱臼法处死小鼠。(4)迅速剖开腹腔,注入05ml生理盐水,牙签将腹腔液和生理盐水混合,未装针头的注射器抽取腹腔液。(5)制片,腹腔液滴在玻片上,然后盖上盖玻片。(6)结果描述。观察注意:光线暗光,低倍找。然后换高倍,蓝色或不规则形状细胞为巨噬细胞。蓝色颗粒是巨噬细胞吞了含台盼蓝淀粉肉汤后形成的吞噬泡(台盼蓝在此处为标记巨噬细胞作用。另外可见一些被吞噬的红细胞。有的一个红细胞周围可见几个吞噬细胞。
5、细胞减速分裂:蝗虫,雌性为24条x,雄性为23条xo。减速分裂为为两个时期,减一期和减二期。减一期有分前I,中I,后I,末I四个时期。
前I又分五个时期:细线期:染色体细线状,绕成一团,首尾不分。偶线期r
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