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紫外分光光度计法测定几种常见果蔬中维生素C的含量
摘要:利用维生素C对紫外产生吸收和对碱不稳定的特性,用紫外分光光度法测定5种常见果蔬中维生素C的含量。最大吸收波长为243
m,标准曲线方程为A000537c,相关系数为R2=099539。9种果蔬中维生素C含量[mg(100g)-1]分别为:青尖椒1118、青1042、韭菜825、小白菜789、西芹5970、胡萝卜498、西兰花28、茄子264、山药149。该方法简单、快速,结果令人满意。
1前言维生素C又称抗坏血酸,是一种水溶性维生素。能预防牙龈出
血及萎缩、提高人体免疫力,对坏血病、动脉硬化、贫血等有一定疗效。天然存在的抗坏血酸有L型和D型2种,后者无生物活性。维生素C是呈无色无臭的片状晶体,易溶于水,不溶于有机溶剂。在酸性环境中稳定,遇空气中氧、热、光、碱性物质,特别是由氧化酶及痕量铜、铁等金属离子存在时,可促进其氧化破坏。氧化酶一般在蔬菜中含量较多,故蔬菜储存过程中都有不同程度流失。但在某些果实中含有的生物类黄酮,能保护其稳定性。
维生素C的测定方法主要有紫外分光光度法、红外光谱法、26-二氯靛酚滴定法、高效液相色谱法、钼蓝比色法、原子吸收法、碘量法、电位滴定法、荧光光度法、毛细管电泳法、流动注射化学发光法212等。其中原子吸收法、高效液相色谱法和荧光光度法仪器相对昂贵;碘量法和电位滴定法操作步骤较繁琐,而且受其它还原性物质、样品色素颜色和测定时间的影响;紫外分光光度法是根据维生素C对紫外产生吸收和对碱不稳定的特性,于243
m处测定样品液与碱处理样品液两者吸光度之差,通过标准曲线方程,即可计算样品中维
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生素C的含量。本实验采用市售的西芹为研究材料,用紫外分光光度法测定
韭菜中维生素C的含量。2实验21材料、试剂和仪器市售西芹10HCl、抗坏血酸、1mollNaOH、蒸馏水UV2000紫外可见分光光度计、KDC40电子天平、FA1104离心
机22方法221标准溶液的配制准确称取0050g抗坏血酸,加10ml10HCl溶解,用蒸馏水定
容至500ml,混匀,即得100ugml维生素C标准溶液。222标准曲线的绘制分别准确移取100ugml维生素C标准溶液0ml、003ml、
006ml、009ml、012ml、015ml、018ml、024ml、030ml于试管中,分别加入蒸馏水至总体积为3ml。以水为参比,在243
m处测定吸光度,以维生素C浓度为横坐标、吸光度为纵坐标,绘制标准曲线。
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223果蔬样品的处理将西芹洗净晾干,取104489g于研钵中,先加入10HCl5ml,
再加入5ml,研磨匀浆,r
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