有限公司
文件编号版号
WI0335A0
溶血性链球菌的测定方法
1．目的
页次生效日期
1220200102
制订溶血性链球菌的测定方法，对从事检测的操作人员进行培训指导，按测定方
法操作。
2．适用范围
本方法适用于溶血性链球菌的测定。
3职责
质检部对本测定方法实施负责。
4程序
41仪器
电子天平、电热恒温鼓风干燥箱、净化工作台、手提式压力蒸汽消毒器、电热恒
温水浴锅、生化培养箱、显微镜
42器具
烧杯（250ml）、量筒（100ml）、三角烧瓶（250ml）、试管、硅胶塞、白金耳、酒
精灯、培养皿（φ90mm）、刻度吸管（1ml5ml，20ml）
43培养基、菌种：
葡萄糖肉汤、血琼脂平板、草酸钾血浆、草酸钾、氯化钙、血平板、染色液（革
兰氏染色用）
44器具灭菌：
与样液接触的所有器具（刻度吸管、培养皿等）应按下述方法灭菌：包好后置手
提式压力蒸汽消毒器内121℃20分钟高压灭菌，或置于电热恒温鼓风干燥箱内
160℃2小时干热灭菌。
45操作步骤
5操作步骤
取样液5mL加入到50mL葡萄糖肉汤，35℃±2℃培养24h。
将培养物划线接种血琼脂平板，35℃±2℃培养24h观察菌落特征。溶血性
链球菌在血平板上为灰白色，半透明或不透明，针尖状突起，表面光滑，边缘整
齐，周围有无色透明溶血圈。
挑取典型菌落作涂片革兰氏染色镜检，应为革兰氏阳性，呈链状排列的球菌。
镜检符合上述情况，应进行下列试验：
链激酶试验：吸取草酸钾血浆02mL001g草酸钾加5mL兔血浆混匀，经离心
沉淀，吸取上清液，加入08mL灭菌生理盐水，混匀后再加入待检菌24h肉汤
培养物05mL和025％氯化钙025mL，混匀，放35℃±2℃水浴中，2mi
观
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WI0335A0
溶血性链球菌的测定方法
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5220200102
察一次一般10mi
内可凝固，待血浆凝固后继续观察并记录溶化时间。如2h
内不溶化，继续放置24h观察，如凝块全部溶化为阳性，24h仍不溶化为阴性。
杆菌肽敏感试验：将被检菌菌液涂于血平板上，用灭菌镊子取每片含004单
位杆菌肽的纸片放在平板表面上，同时以已知阳性菌株作对照，在35℃±2℃下放
置18～24h，有抑菌带者为阳性。
6结果报告
镜检革兰氏阳性链状排列球菌，血平板上呈现溶血圈，链激酶和杆菌肽试验阳性，
可报告被检样品检出溶血性链球菌
7．记录保存：
71．品管部保管5年。
8．相关操作规程
91．电热鼓风干燥箱操作规程
92．HWS12型电热恒温水浴锅操作规程
93．生化培养箱操作规程
94．YX手提式压力蒸汽消毒器操作规程
95．净化工作台操r