实验十血糖的测定
血液中的葡萄糖称血糖。正常人血糖浓度较恒定，维持在3．9mmol／L～6．1mmol／L之间。血糖浓度的相对恒定是机体进行正常生理活动的前提条件之一，有着双重实际意义：其一，维持稳定的能源供给，满足机体在各种生理状态下对能量的需求。其二，保证机体不因进食致血糖浓度过高，导致糖的丢失。
因此，血糖的测定是临床生化检验实验室的常规检测项目。血糖测定按其发展过程及反应原理的不同，大致分三类：氧化还原法，缩合法（主要有邻甲苯胺法），酶法（主要有己糖激酶法和葡萄糖氧化酶法）。下边介绍两种方法供选择。
一、葡萄糖氧化酶法【目的】1了解葡萄糖氧化酶法测定血糖的原理，能进行血糖测定的操作。2掌握血糖测定的临床意义。【原理】葡萄糖氧化酶glucoseoxidase，GOD能将葡萄糖氧化为葡萄糖酸和过氧化氢。后者在过氧化物酶peroxidase，POD作用下，分解为水和氧的同时将无色的4氨基安替比林与酚氧化缩合生成红色的醌类化合物，即Tri
der反应。其颜色的深浅在一定范围内与葡萄糖浓度成正比，在505
m波长处测定吸光度，与标准管比较可计算出血糖的浓度。反应式如下：
葡萄糖O22H2OGOD葡萄糖酸2H2O2
2H2O24氨基安替比林酚POD红色醌类化合物【器材】试管、吸管、试管架、恒温水浴箱、分光光度计【试剂】101molL磷酸盐缓冲液（pH70）称取无水磷酸氢二钠867g及无水磷酸二氢钾53g溶于800ml蒸馏水中，用1molL氢氧化钠（或1molL盐酸）调节pH至70，然后用蒸馏水稀释至1L。2酶试剂称取过氧化物酶1200U，葡萄糖氧化酶1200U，4氨基安替比林10mg，叠氮钠100mg，溶于上述磷酸盐缓冲液80ml中，用1molLNaOH调pH至70，加磷酸缓冲液至100ml。
f置冰箱保存，4℃可稳定3个月。
3酚溶液
称取重蒸馏酚100mg溶于100ml蒸馏水中（酚在空气中易氧化成红色，可先配成500gL
的溶液，贮存于棕色瓶中，用时稀释），用棕色瓶贮存。
4酶酚混合试剂
取上述酶试剂与酚溶液等量混合，4℃可以存放一个月。
512mmolL苯甲酸溶液
溶解苯甲酸14g于蒸馏水约800ml中，加温助溶，冷却后加蒸馏水至1L。
6．葡萄糖标准贮存液（100mmolL）
称取已干燥恒重的无水葡萄糖1802g，溶于12mmolL苯甲酸溶液约70ml中，并移入
100ml容量瓶内，再以12mmolL苯甲酸溶液加至100ml。
7葡萄糖标准应用液（5mmolL）
吸取葡萄糖标准贮存液50ml于100ml容量瓶中，加12mmolL苯甲酸溶液至刻度。
【操作】
取3支试管编号，按下表操作。
表312血糖测定操作步骤
加入物ml
空白管
标r