，发展了离体种质资源冷冻保存或超低温保存技术。
第一节植物种质资源的常温限制生长保存一、常温限制生长保存的概念
在正常条件下的组织培养不适合种质保存。因为在这种条件下，材料生长很快，需经常进行转接。不仅使保存工作量加大费用升高，也导致在转接中污染和由取样的随机性造成基因资源的丢失。
因此，理想的保存方法是使培养物处于无生长或缓慢生长状态下抑制植物的生长，减少继代次数，达到长期保存目的。需要时可以迅速恢复正常生长。抑制生长的外植体可以是茎段、茎尖及愈伤组织。二、常温限制生长保存的方法和原理（一）高渗保存法
高渗保存法是指通过提高培养基的渗透压，减少离体培养物从培养基中吸收养分和水分的量，减缓生理代谢过程，从而减缓生长速度，达到抑制培养物生长的保存方法。（继代培养间隔时间可延长到1年）
方法：1）提高蔗糖浓度：10左右，就可达到抑制培养物生长的目的。由于蔗糖是组培中最常用的碳源和能源，提高渗透压的同时又对材料生理代谢产生不利的影响。
2）添加惰性物质：如甘露醇、山梨醇等都是优良的渗透压调节物质，这样可以使其限制离体培养物生长的作用维持更久。一般用4～6甘露醇处理培养基，或用2～3蔗糖加2～5的甘露醇混合处理。
3）增加培养基中琼脂的用量来提高渗透压，降低培养物的生长速率。（二）生长抑制剂保存法
在离体种质保存中使用植物生长抑制剂可以延缓或抑制离体培养物的生长，延长继代时间以达到离体保存种质的目的。
生长抑制剂保存法是指在培养基中加入生长抑制剂或延缓剂如ABA、青鲜素、矮壮素（CCC）、B9、多效唑、烯效唑等。（三）常温限制生长的其他保存法1．低压保存法
通过降低培养容器内氧分压或改变培养环境的气体状况，能抑制离体培养物细胞的生理活性，延缓衰老，从而达到离体保存种质的目的。
不得用于商业用途
f仅供个人参考低压保存方法：降低气压和降低氧分压。降低气压是通过降低培养物周围的大气压而起作用，其结果是降低了所有气体分压，使培养物的生长速度降低。降低氧分压是在正常气压下，向培养容器中加进氮气等惰性气体，使其中氧分压降低到较低水平，从而达到抑制生长
的目的。2．饥饿法
即从培养基中减去某种或几种营养元素，或者降低某些营养物质的浓度，或者略微改变培养基成分，使培养植株处于最小生长阶段。
通过调整培养基的养分水平（l2MS、l4MS），可有效地限制细胞生长。如菠萝组培苗在l4MS培养基上保存1年，小苗存活率达到100。
第二节植r