高中生物选修3基础知识总结
专题一基因工程原理：基因重组
基因工程的概念：基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外DNA重组和转基因技术，
赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程是在
DNA分子水平上进行设计和施工的，又叫做DNA重组技术。定向改造生物的遗传性状。
（一）基因工程的基本工具
1“分子手术刀”限制性核酸内切酶（限制酶）
（1）来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。
（2）功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列（回文序列），并且使每一条链中特定部
位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。（注意“酯”的写法）
（3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。
2“分子缝合针”DNA连接酶
1两种DNA连接酶（EcoliDNA连接酶和T4DNA连接酶）的比较：①相同点：都缝合磷酸二酯键。
基因工程的别名操作环境
基因拼接技术或DNA重组技术生物体外
②区别：EcoliDNA连接酶来源于大肠杆操作对象
基因
菌，只能将双链DNA片段互补的操作水平
DNA分子水平
黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶来源于T4噬菌体，能缝合两种末端，但连接平末端的之间的效率较低。
基本过程实质结果
剪切→拼接→导入→表达基因重组人类需要的基因产物（定向的
2DNA聚合酶、RNA聚合酶和DNA连接酶的比较：
3“分子运输车”载体（1）载体具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存。②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA
片段插入。③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。④安全无毒⑤大小合适
（2）最常用的载体是质粒它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。
（3）其它载体：噬菌体的衍生物、动植物病毒
二基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的获取1目的基因是指：编码蛋白质的结构基因或具有调控作用的因子。2目的基因的获取有三种方法：从基因文库中获取；PCR扩增目的基因；人工化学法合成。3PCR技术扩增目的基因（1）原理：DNA复制（2）过程：第一步：加热至90～95℃DNA解链；第二步：冷却到55～60℃，引物结合到互补DNA链；
第三步：加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶（Taq酶）从引物起始互补链的合成。（3）条件：模板、耐高温的DNA聚合酶（Taq酶）、引物、脱氧核苷酸、精确的温度控制、能量第二步：基因表达载体的构建r