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第八章植物基因工程基因工程:在基因的水平上改造生物的技术体系,是指在体外对生物DNA进行剪切、加工,把不同亲本的DNA分子重新组合,并把它引入细胞中表达出具有新的遗传特性的生物这一过程。植物基因工程:又称植物遗传转化转基因,是将外源基因转移到植物细胞内,并稳定地整合、表达与遗传的技术。目的是改变植物性状,培育高产、优质highyield、抗逆新品种系;或者利用转基因植物细胞来生产外源基因的表达产物。植物转基因研究的用途:1)理论研究:如基因功能分析;2)实践应用:如作物遗传改良。基因工程的基本内容1)目的基因的分离;2)目的基因与载体连接;3)重组分子转入寄主细胞并繁殖;4)阳性克隆的筛选;5)从阳性克隆中提取已扩增的目的基因;6)目的基因克隆到表达载体,导入寄主细胞并表达。植物基因工程的一般流程目的基因的分离→表达载体的构建→植物遗传转化→转化体的筛选、鉴定与植株再生→转基因植物的分子检测→转基因植物的表型鉴定→转基因植物的遗传分析、田间试验经遗传改良的生物统称:ge
eticallymodifiedorga
ismGMO;Ge
eticallye
gi
eeredorga
ismGEO。转基因植物tra
sge
icpla
ts又称:ge
eticallymodifiedpla
tGMP;ge
eticallymodifiedcropGMC。第一节目的基因的分离目的基因:已经或准备要分离、改造、扩增或表达的特定基因或DNA片段,称为。可能是1)全长基因:外显子内含子转录启动区终止区;2)全长cDNA:UTR区编码区(ORF);3)开放读框编码区(ORF,CDS);信使核糖核酸mRNA分子中能翻译成多肽的那部分序列。来自DNA分子中的外显子。4)一个完整的操纵子或基因簇;5)只含启动子或终止子等元件的DNA片段。1分离目的基因的策略方法:1基于已知同源序列分子杂交筛库与PCR;cDNA文库和基因组文库(1)构建基因组文库或cDNA文库;基因组文库:将生物基因组DNA切割成一定大小的片段,与合适的载体连接并导入宿主细
f胞,进行扩增。这些存在于所有重组体内的基因组DNA片段的集合,即基因组文库,包含该生物所有的基因。cDNA文库cDNAlibrary:以某一组织、器官或处理材料中的mRNA为模板,逆转录成双链cDNA分子,插入载体形成重组分子,再导入宿主细胞进行扩增。这些在重组体内的cDNA的集合,即为cDNA文库,包含正在表达的基因。(2)用已知或同源序列标记探针、筛库。经典、较常用。筛库菌落原位杂交如果所要获得的基因在其它植物上已经分离序列已知则可以采取以下两种方法分离研究植物r
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