第三节高效液相色谱法的主要类型及其分离原理
【教学目标】1掌握液液分配色谱法及化学键合相色谱法的分离原理，分配系数、固定相的类型和特点2熟悉高效液相色谱法的主要类型3熟悉高效液相色谱法的主要类型4了解各类高效液相色谱法的特点及应用【教学重点】
液液分配色谱法及化学键合相色谱法；分离原理；分配系数【教学难点】
分配系数；分配系数与组分流出顺序的关系【复习题】1气相色谱法有哪几种类型？各类气相色谱法的固定相与流动相的类型是什么？2各类气相色谱法的分离原理是什么？3分配系数的定义是什么？意义是什么？
【讲授新课】与气相色谱一样，液相色谱分离系统也由两相固定相和流动相组成。液相色谱的固
定相可以是固定液、吸附剂、化学键合固定相（或在惰性载体表面涂上一层液膜）、离子交换树脂或多孔性凝胶；流动相是各种溶剂。被分离混合物由流动相液体推动进入色谱柱。根据各组分在固定相及流动相中的吸附能力、分配系数、离子交换作用或分子尺寸大小的差异进行分离。色谱分离的实质是样品分子（以下称溶质）与溶剂（即流动相或洗脱液）以及固定相分子间的作用，作用力的大小，决定色谱过程的保留行为。
根据其分离原理不同，高效液相色谱法可分为几种类型：
一．液液分配色谱法及化学键合相色谱法
（一）液液分配色谱法1固定相：将液体固定液涂渍在担体上作为固定相。
流动相：液体。且要求，流动相液体与固定相液体互不相溶。2．分离原理：溶解溶解分配平衡过程（组分溶解在固定相中组分溶解在流动相中），类似于液液萃取机理。溶质在两相间进行分配时，在固定液中溶解度较小的组分较难进入固定液，在色谱柱中向前迁移速度较快；在固定液中溶解度较大的组分容易进入固定液，在色谱柱中向前迁移速度较慢，从而达到分离的目的。
3分配系数：当样品中的被测定组分在固定相和流动相中达到动态平衡时，可以用分配系数来描述这
个分配平衡过程：
f其中，（1）分离的顺序决定于分配系数的大小：
固定相对某组分的溶解力大于溶剂对某组分的溶解力，K↑，后流出色谱柱固定相对某组分的溶解力小于溶剂对某组分的溶解力，K↓，先流出色谱柱
（2）某色谱条件下，两组分分配系数差值为零，则代表两组分在该色谱条件下不能分离。4分类：
正相液液色谱法：固定相极性＞流动相极性，
极性较小组分先出峰，极性较大组分后出峰适于分离极性较强的物质
反相液液色谱法：固定相极性＜流动相极性
极性较大组分先出r