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分光光度计的使用方法
一、实验原理吸光光度法是根据物质对光选择性吸收而进行分析的方法。其理论基础是光的吸收定律朗伯比尔定律:
AKdc
当液层厚度d以cm,吸光物质浓度c以molL-1为单位时,系数
K就以ε表示,称为摩尔吸光系数。朗伯比尔定律表示为:Aεdc
二、仪器介绍吸光光度法具有较高的灵敏度和一定的准确度,特别适合于微量组分的测量。吸光光度法操作简便、快速、适用范围广,在分析化学中占有重要的地位。吸光光度法的主要仪器是分光光度计,其主要结构如下:光源单色器比色皿光电元件输出装置
7220型分光光度计是较为常用的一种数字显示分光光度计。它以碘钨灯为光源,光栅为色散元件。可用波长范围是330800
m,波长精度2
m,波长重现性为05
m,单色光带宽6
m,吸光度显示范围为01999,吸光度的精度为0004A05,试样架可置四个吸收池。1、样品室门2、显示窗3、波长显示窗4、波长调节旋钮
f5、电源开关6、操作键区7、样品池拉手操作键区面板从左至右:1、方式选择2、100T、ABS03、0T4、选标样点5、置数加6、置数减7、确认8、打印
三、仪器使用方法1、开机安装好仪器后,检查样池位置,使其处在光路中(拉动拉手应感应到每档的定位),关好样品室门,打开仪器电源开关,预热10分钟,即可进行测量。2、打开样品室门,将方式定于透过率档,按0T进行机械调零。3、从蒸馏水中取出比色皿,擦干。注意拿比色皿的时候拿毛玻璃面。向比色皿内注入少量试液,润洗三次,然后注入34至45的试液,用滤纸片擦干外壁所挂水珠。将比色皿按顺序放入样品池。注
f意光面对光源。4、在样品池中放置空白液与样品5、按需要调节波长旋钮,使显示窗显示所需波长。6、使空白溶液位于光路中,按方式选择键使吸光度指示灯亮,按100T键调100,至窗口显示100。7、打开样品室门,将功能调于透射比档,观察显示是否为00,若否则按0T键调零。调零后再放回吸光度档。8、重复上两步,直至仪器稳定。9、将样品置入光路,从显示屏上读取吸光度。用7220型分光光度计可以直接测出样品浓度。测定采用工作曲线法,曲线由仪器自动生成,并自动给出样品浓度。
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