生物化学实验报告
姓名：
XXX
学号：XXXXXX专业年级：临床八年制__组别：第二实验室
f实验名称
TitleofExperimet

实验日期
DateofExperime
t
XX
合作者
Part
er
XXX
总分
TotalScore
一、实验预习
氨基酸的薄层层析
教师签名
Sig
ature
实验地点LabNo
第二实验室
指导老师
I
structor
XXXX
批改日期
Date
10实验目的
掌握薄层层析法的一般原理。
掌握氨基酸薄层层析法的基本操作技术。
掌握如何根据移动速率（Rf值）来鉴定被分离的物质（即氨基酸混合液）。
11实验原理
111薄层层析原理：（是色谱分析技术的一种）
一般是将固体吸附剂涂布在平板上形成薄层作为固定相。当液相（展开溶剂）
在固定相上流动时，由于吸附剂对不同氨基酸的吸附力不一样，不同氨基酸在展开溶剂
中的溶解度不一样，点在薄板上的混合氨基酸样品随着展开剂的移动速率也不同，因而
可以彼此分开。（即通过吸附解吸再吸附再解吸的反复进行，而将样品各组分分离开
来）
112氨基酸与茚三酮的显色反应
茚三酮水化后生成的水合茚三酮在加热时被还原，此产物与氨基酸加热分解产生的
氨结合，以及另一分子水合茚三酮缩合生成蓝紫色化合物而使氨基酸斑点显色。
113基于相对迁移率Rf值判定混合氨基酸组分
f层析中，物质沿溶剂运动方向迁移的距离与溶液前沿的距离之比为Rf值。即：
原点到层析斑点中心的距离Rf原点到斑点对应前沿的距离由于物质在一定溶剂中的分配系数是一定的，故移动速率（Rf值）也是恒定的，因此可以根据Rf值来鉴定被分离的物质。
12实验材料121实验样品
①001molL丙氨酸：称取丙氨酸89mg溶于90异丙醇溶液至10ml。②001molL精氨酸：称取精氨酸174mg溶于90异丙醇溶液至10ml。③001molL甘氨酸：称取甘氨酸75mg溶于90异丙醇溶液至10ml。④混合氨基酸溶液：将001molL丙氨酸、精氨酸、甘氨酸按等体积制成混
合溶液。（上述溶液已由老师提前制备完成）
122实验试剂①吸附剂：硅胶GCP。②粘合剂：05羟甲基纤维素钠（CMCNa）：取羟甲基纤维素钠5g溶于1000ml
蒸馏水中，煮沸，静置冷却，弃沉淀，去上清备用。
③展开溶剂：按801010（VVV）混合正丁醇、冰醋酸及蒸馏水，临用前
配制。
④01茚三酮溶液：取茚三酮（AR）01g溶于无水丙酮（AR）至100ml。⑤展层显色剂：按照101比例（VV）混合展开剂和01茚三酮溶液。123实验主要仪器和器材
①层析板（6cm15cm）；②小烧杯；③量筒10mL；④小尺子；⑤毛细玻璃管；⑥层析缸；⑦烤箱；⑧天平；⑨药匙。
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