人心肌肌钙蛋白I的几种检测方法及其应用研究
心肌肌钙蛋白I（cT
I）是组成心肌肌钙蛋白复合物的亚单位之一，具有高度的心肌特异性，被认为是诊断心肌损伤的“金标准”。快速、灵敏、准确测定人血中的cT
I对于诊断急性心肌梗死、急性冠状动脉综合征的危险分层、监测各种因素所导致的心肌损伤、以及心脏事件的判断预后等有着重要的意义。
目前，测定cT
I的方法主要有放射性同位素免疫分析法（RIA）、酶联免疫吸附试验法（ELISA）、化学发光免疫分析法（CLIA）、荧光免疫分析法（FIA）、以及金标免疫分析法等。其中，RIA法因有放射性污染的危险已基本不使用；CLIA法和FIA法灵敏度较高，但仪器价格偏高，国内在这方面的研究相对较少；金标免疫分析法主要应用于制作定性分析用的免疫层析试纸条，现在国内各医院多使用国外公司的产品，价格昂贵，国内学者虽在这方面有不少研究，但其灵敏度不高，难以推向市场；目前国内研究和应用最多的方法是ELISA，该方法灵敏度适中，使用相对简便，仪器价格也不很高，但存在测定周期偏长、灵敏度相对较低、检测范围较窄等不足。
考虑到检测人血液中cT
I对于判断心肌损伤的重要性，以及目前国内测定cT
I的方法所存在的这样或那样的缺陷，本论文从快速、灵敏、准确测定和降低检测成本等方面入手，综合应用纳米金标记技术、纳米孔材料上的生物分子固定化技术、以及高灵敏的电化学检测技术和化学发光检测技术，建立了几种测定人cT
I的方法，弥补了现有方法的某些不足。具体内容如下：1．金标银染法快速检测人血清中cT
I的研究纳米金具有特殊的光学和电学性质，生物相容性好，是继放射性同位素、酶、发光（荧光）物质之后的又一种卓越的免疫标记物质，银染技术的引进使其可见性得以显著提高，从而使免疫检测的灵
f敏度随之大幅度提高。本文以硝酸纤维膜作为基底，结合一步法双单克隆抗体夹心技术、低密度蛋
白芯片技术、纳米金探针技术、以及纳米金颗粒上的银染放大技术建立了一种检测人心肌肌钙蛋白I的快速测定法。方法具有极高的特异性，当血清样品中心肌肌钙蛋白T（cT
T）、肌红蛋白（Mb）、以及骨骼肌肌钙蛋白I（sT
I）的浓度分别高达02μg／mL、100μg／mL、以及30μg／mL时，仍然不干扰cT
I的测定和判断；检测速度快，能在40分钟内报告测定结果；耗样量少，一次测定只需要10μL血清样本；方法重复性好，同一样品在同一块基片上的测定结果的批内变异系数（
8）以及不同时间在不同基片上的测定结果的批间变异系数（
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